طراحی و توسعه نانوساختار بر پایه نیوزوم پگیله لود شده با کورکومین و اگزالوپلاتین: جهت درمان موثر سلول های سرطان روده مقاوم به داروی اگزالوپلاتین از طریق تعدیل بیان ژن hTERT

Abstract

درمان سرطان کولورکتال (CRC) با یک مانع مهم در قالب مقاومت چند دارویی مواجه است. این مانع به دلیل توانایی داروهای شیمی درمانی مختلف مانند 5-فلورواوراسیل، اگزالیپلاتین و ایرینوتکان برای بی اثر شدن در برابر CRC ایجاد می شود. توسعه مقاومت به چند دارو عمدتاً به مکانیسم مهمی مربوط می شود که شامل افزایش جریان داروها به خارج از سلول ها توسط انتقال دهنده های کاست اتصال دهنده ATP، به ویژه P-گلیکوپروتئین است. در این مطالعه از فرم آزاد و نیوزومی بارگذاری شده اگزالیپلاتین به عنوان عامل شیمی درمانی در ترکیب با فرم آزاد و باردار نیوزومی کورکومین بر روی سلول های CRC نرمال و مقاوم به اگزالیپلاتین استفاده شد و اثرات آنها بر بقا، آپوپتوز و توقف چرخه سلولی این سلول ها ارزیابی شد. . کورکومین به عنوان یک عامل مهارکننده مقاومت دارویی مورد استفاده قرار گرفت و توانایی بازگشت مقاومت به دارو با سطح بیان MRP2 ارزیابی شد. مواد و روش: در مرحله اول، سلول های SW480 مقاوم به اگزالیپلاتین از رده سلولی SW480 طبیعی به دست آمد. نانو ذرات خالی نیوزومی (NPs)، نیوزومال بارگذاری شده با کورکومین (NPs)، و نیوزومال بارگذاری شده اگزالیپلاتین (NPs) با استفاده از روش هیدراتاسیون لایه نازک ساخته شدند و با SEM، AFM، DLS و FTIR مشخص شدند. یک سنجش تکثیر برای ارزیابی سمیت سلولی این عامل بر روی سلول های سرطانی انجام شد. توانایی کورکومین و نیوزوم بارگذاری شده با کورکومین در بازگشت مقاومت دارویی سلول‌های SW480 با تکنیک Real Time PCR و ارزیابی سطح بیان MDR2 مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته ها: یافته های میکروسکوپی و نتایج FT-IR بارگذاری موفق دارو را نشان داد. نتایج MTT نشان دهنده توقف قابل توجه سلول در مقایسه با گروه کنترل بود. ارزیابی سمیت دارویی نشان داد که اگزالی پلاتین بارگذاری شده در نانوذرات نیوزومی PEGylated اثرات سمی بیشتری نسبت به حالت خالص به صورت وابسته به زمان و دوز دارد. نتایج Real-Time PCR نشان داد که کورکومین و اگزالی پلاتین به صورت آزاد و بارگذاری شده در نانوذرات به طور قابل توجهی بیان ژن‌های MRP2، Cyclin D1، BCL-2 و hTERT را مهار کرده و بیان BAX را افزایش می‌دهند. نتایج آزمایش آپوپتوز نشان داد که مرگ سلولی در حضور نانوذرات نیوزومی بارگذاری شده با اگزالیپلاتین از نوع آپوپتوز است. کورکومین و اگزالی پلاتین هر دو اثر سیتوتوکسیک را بر سلول های سرطانی نشان می دهند، اگرچه اگزالی پلاتین و نانوذرات نیوزومی کولود شده با کورکومین دارای بالاترین سمیت سلولی هستند.