جداسازی IVIg از پلاسمای فاقد کرایو انسانی با روش تلفیقی رسوب‌دهی با استفاده از پلی اتیلن گلیکول و تغییرات pH

Abstract

مقدمه: خون، مایع حیاتی بدن انسان، عمدتا از پلاسما تشکیل شده است. پلاسما منبع پروتئین‌های بسیار ارزشمند برای حفظ بقای بدن می باشد. ایمونوگلوبولین‌ها از جمله پروتئین‌های پلاسما هستند که نقش مهمی در سیستم ایمنی بدن ایفا می کنند. عمده ترین ایمونوگلوبولین پلاسما، ایمونوگلوبولین نوع G (IgG) است. فراورده بیولوژیکی مشتق شده از IgG پلاسما، ایمونوگلوبولین G داخل وریدی (IVIg) می باشد و در درمان بیماری های خودایمنی و اختلالات نقص ایمنی کاربرد دارد. هدف: پلاسمای فاقد کرایو (CPP) یکی از محصولات جداسازی شده در سازمان انتقال خون بوده که حاوی مقادیر بالای آلبومین و ایمونوگلوبولین هاست اما غالبا بلااستفاده مانده و دور ریخته می شود. به همین جهت ابداع متدهای کاربردی جهت جداسازی اجزای پروتئینی با ارزش این منبع خونی از اهمیت بالایی برخوردار است. روش کار: در این مطالعه جداسازی IVIg از پلاسمای فاقد کرایو انسانی به روش تلفیقی رسوب دهی به وسیله تغییرات pH و با استفاده از 8000 PEG بررسی شده است. به جهت آنالیز الگوی رسوب پروتئین ها، روش های SDS-PAGE و Native-PAGE با متد رنگ آمیزی نیترات نقره به کار رفته است. نتایج: با توجه به نتایج حاصل از این مطالعه استفاده از pH برابر 4.6 برای رسوب آلبومین بهترین نتیجه را داشته و در ادامه استفاده از 8000 PEG و میزان 10 درصد وزنی حجمی بیشترین تاثیر در جداسازی IVIg از پلاسمای فاقد کرایو را نشان داد. بحث و نتیجه گیری: نتایج مطالعه حاضر حاکی از این بود که این روش در صورت بهینه سازی شرایطPH و درصد PEG میتواند در خالص سازی آلبومین و ایمونوگلوبولین نوع G بسیار موثر واقع شود.