بررسی اثر القایی داربست فیبرینی به همراه سلول¬های اندوتلیال و ملاتونین بر میزان آنژیوژنزیس، کیفیت فولیکول¬ها و جنین بر بافت تخمدان پیوندی منجمد شده
چکیده
یکی از روش¬هایی که در جهت حفظ باروری صورت می¬گیرد، انجماد و پیوند بافت تخمدان می¬باشد. از آن جا که تاخیر در آنژیوژنزیس و آسیب¬های ناشی از ایسکمی مشکل اصلی در پیوند می¬باشد، محققین به دنبال رویکردهای جدید جهت تسریع رگ¬زایی و بهبود کیفیت بافت تخمدانی پیوند شده می¬باشند. مطالعه حاضر با هدف بررسی اثر القایی داربست فیبرینی به همراه سلول¬های اندوتلیال و ملاتونین بر میزان آنژیوژنزیس، کیفیت فولیکول¬ها و جنین بر بافت تخمدان پیوندی منجمد شده در موش¬های صحرایی انجام شد.
روش انجام کار: موش¬های صحرایی ماده نژاد ویستار به 6 گروه تقسیم شدند: گروه کنترل، گروه FT: تخمدان¬هایی که پس از انجماد و ذوب به زیر پوست پیوند شدند، گروه FHT: تخمدان¬هایی که پس از انجماد و ذوب همراه با هیدروژل آلژینات-فیبرینی به زیر پوست پیوند شدند، گروه FHT+Mel، تخمدان¬هایی که پس از انجماد و ذوب همراه با هیدروژل آلژینات-فیبرینی به همراه ملاتونین به زیر پوست پیوند شدند، گروه FHT+ECs، تخمدان¬هایی که پس از انجماد و ذوب همراه با هیدروژل آلژینات-فیبرینی به همراه سلول¬های اندوتلیال به زیر پوست پیوند شدند، گروه FHT + Mel+ ECs تخمدان¬هایی که پس از انجماد و ذوب همراه با هیدروژل آلژینات-فیبرینی به همراه سلول¬های اندوتلیال و ملاتونین به زیر پوست پیوند شدند.
تخمدان‌ها پس از گذشت 14 روز خارج شده و سپس به منظوربررسی بیان ژن‌های Ang I و Ang II، روش RT-PCR و برای ارزیابی فاکتورهای VWF و α-SMA، تکنیک IHC و برای ارزیابی نواحی فیبروتیک رنگ‌آمیزی ماسون تری کروم و برای ارزیابی کیفیت فولیکول¬ها رنگ آمیزی H&E انجام شد.
یافته¬ها: آنالیز آماری داده¬ها نشان داد که نسبت بیان ژن¬های Ang I/ Ang II در گروه FHT+Mel نسبت به گروه FT افزایش معنا دار داشته است. در حالیکه سایر گروه¬ها تفاوت معنی¬ داری را نشان نمی¬داد. همچنین بیان فاکتورهای VWF و α-SMA در گروه¬های FHT+Mel و FHT+ECs نسبت به FT افزایش قابل توجهی را نشان داد. بررسی هیستومورفولوژی نمونه¬های تخمدانی نیز نشان داد که انسجام بافت تخمدانی و تعداد فولیکول¬ها در گروه FT به میزان زیادی از بین رفته است. در گروه¬های هیدروژل به تنهایی و همینطور هیدروژل همراه با سایر ترکیبات گرچه انسجام بافت تخمدان حفظ شده بود، اما تغییر قابل توجهی در تعداد و کیفیت فولیکول¬ها مشاهده نشد. رنگ آمیزی ماسون تری کروم نیز افزایش نواحی فیبروتیک را در گروه FT نشان داد، این در حالیست که در گروه¬های FHT، FHT+Mel و FHT+ECs کاهش نواحی فیبروز را شاهد بودیم.