بررسی میزان فراوانی سلول های Treg و میزان بیان میکرو RNA ها و فاکتورهای موثر در تکامل سلول های Treg در بیماران مبتلا به نارسایی زودرس تخمدان
چکیده
با توجه به این که POF مشکل اساسی زنان زیر 40 سال است و عواقب منفی این بیماری که شامل ناباروری، افزایش خطر ابتلا به بیماری های قلبی و عروقی ، اختلال عملکرد جنسی و پوکی استخوان است بنابراین باید دنبال عوامل موثر در این بیماری و عواقب ناشی از آن بود. با توجه به مطالعات انجام شده که نشان می دهد نقش سیستم ایمنی در یک بارداری موفق و نرمال و تولد نوزاد زنده بسیار چشمگیر می باشد و نیاز به تحقیق و بررسی در زمینه ی تغییرات و اختلالات آن با افزایش میزان ناباروری در دنیای امروز، بیش از پیش به چشم می خورد. سلول های Treg نقش مهمی در ممانعت از بیماریهای خودایمنی دارند . بنابراین، کاهش تعداد یا عملکرد این سلول ها می تواند در بروز خود ایمنی ها مؤثر باشد؛ به طوری که نقص این سلول ها در بسیاری از بیماری های خودایمنی گزارش شده است ,تغییرات اپی ژنتیکی قادر به تغییر در عملکرد سلول های دخیل در باروری بوده و مسلما اختلال یا عدم تنظیم آنها می تواند از عوامل دخیل در ناباروری باشد. ما در این مطالعه به بررسی میزان فراوانی سلول های Treg و میزان بیان میکرو RNA ها و فاکتورهای موثر در تکامل سلول های Treg در بیماران مبتلا به نارسایی زودرس تخمدان (POF) می پردازیم.
مواد و روش ها: برای انجام این طرح، ابتدا از زنان مبتلا به نارسایی زودرس تخمدان (POF) که جمعیت هدف ما در این طرح می باشند رضایت نامه ی کتبی و آگاهانه دریافت شد. برای شروع مطالعه از این افراد خون هپارینه گرفته شد و سلول های تک هسته ای خون (PBMC) جدا شدند. سپس برای شمارش تعداد سلول های Treg از تکنیک فلوسایتومتری استفاده شد . جهت بررسی میزان بیان میکرو RNA مرتبط با این سلول که miRNA-155 می باشد ، از روش Quantitative PCR و برای بررسی میزان ترشح سایتوکاین های مترشحه از سلول های Treg از روش الایزا استفاده کردیم.
یافته ها: فراوانی سلول های Treg و به دنبال آن بیان فاکتور نسخه برداری Foxp3 و بیان TGF-β به شدت در این بیماران نسبت به گروه کنترل کاهش یافته بود. میزان ترشح TGF-β بطور معناداری در این بیماران نسبت به گروه کنترل کاهش یافته بود. نتایج بررسی میکروRNA مرتبط با سلول¬های Treg نیز افزایش بیان miRNA-155 را نشان داد.