نقش سرکوب بیان ژن گیرنده های آلفا هفت نیکوتینی استیل کولین با استفاده از RNA کوچک مداخله گر (siRNA) بر مقاومت دارویی به اگزالی پلاتین در رده سلولی سرطان کولورکتال

Abstract

سرطان کولورکتال (CRC) از سرطان های شایع در جهان به شمار می رود که سالانه نزدیک به 2/1 میلیون نفر به آن مبتلا می شوند و منجر به فوت حدود 700 هزار بیمار مبتلا به این سرطان در جهان می شود. داروی اگزالی پلاتین (OXA) به عنوان یکی از داروهای شیمی درمانی مورد استفاده در این سرطان مطرح می باشد. از طرفی گیرنده آلفا 7 نیکوتینی استیل کولین و یا به اختصار α7nAchR یکی از اجزای خانواده گیرنده های نیکوتینی است که در انواع مختلف سرطان ها و بحث مقاومت به عوامل شیمیایی دارای اهمیت می باشد. تاکنون نقش بیان α7nAchR در پیشرفت CRC، به ویژه در سلول های مقاوم به دارو، شناسایی نشده است. بنابراین، این مطالعه به منظور بررسی اثر سرکوب α7nAchR توسط siRNA در ترکیب با اگزالی پلاتین در سلول‌های SW-480 مقاوم به دارو طراحی و اجرا شده است. روش کار: سلول های SW-480 مقاوم به OXA تولید شدند. سپس، روش الکتروپوریشن برای انتقال siRNA به سلول‌ها برای مهار بیان α7nAchR مورد استفاده قرار گرفت. سلول ها پس از ترانسفکت شدن با OXA تیمار شدند. IC50 OXA و ترکیب α7nAchR siRNA و OXA بر روی بقای سلول‌های مقاوم با استفاده از آزمون MTT تعیین شد. از qRT-PCR برای ارزیابی بیان ژن‌های α7nAchR، MDR-1، BCL-2، و Caspase-3 استفاده شد. یافته ها: نتایج تحقیق نشان دادند که سرکوب بیان α7nAchR می‌تواند باعث ایجاد حساسیت در سلول‌های SW-480 مقاوم به اگزالی پلاتین شود. این مطالعه همچنین کاهش قابل توجهی را در بیان ژن α7nAchR mRNA زمانی که siRNA و OXA به طور همزمان در سلول‌های مقاوم استفاده می‌شوند، نشان داد. همچنین کاهش بیان ژن های MDR-1 و BCL-2 به همراه افزایش بیان ژن Caspase-3 به دنبال ترانسفکشن با a7-siRNA مشاهده شد.