بررسی اثر سوپرناتانت سلول‌های بنیادی عصبی بر روی نورونزایی، مسیر Wnt-β catenin signaling و رفتارهای عصبی شناختی در مدل بیماری آلزایمر

Abstract

بیماری آلزایمر یک اختلال وابسته به سن و تخریب کننده عصبی پیشرونده است که در حال حاضر تعداد زیادی از افراد در جوامع مختلف را تحت تاثیر قرار داده است. مطالعات نشان داده‌اند که سلول‌های بنیادی عصبی توانایی ترشح فاکتور‌های نوروتروفیک را دارا هستند و از آنجا که این فاکتورها توانمندی زیاد و موثری در بهبود مغز آسیب دیده دارند در این مطالعه اثر سوپرناتانت سلول‌های بنیادی عصبی بر مسیر Wnt-β Catenn ، نورونزایی و رفتارهای شناختی در مدل بیماری آلزایمر مورد مطالعه قرار گرفت. روش انجام کار: در مطالعه حاضر موش‌ها به سه گروه کنترل، گروه آلزایمر و PBS و گروه آلزایمر و سوپرناتانت تقسیم شدند. برای ایجاد آلزایمر، پروتئین آمیلوئید بتا 1-42 به بطن‌های طرفی تزریق شد و پس 21 روز از تست رفتاری شاتل باکس جهت تایید مدل آلزایمر استفاده شد. سپس سوپرناتانت و PBS جهت تیمار به گروه‌ها تزریق شد. برای بررسی میزان تکثیر سلول‌های بنیادی عصبی درونزاد BrdU kbW/gµ 50 به صورت درون صفاقی به مدت 5 روز تزریق شد. یک ماه پس از آخرین دوز BrdU حافظه فضایی موش‌ها توسط ماز آبی موریس مورد بررسی قرار گرفت. بیان BrdU/Nestin و BrdU/NeuN با روش ایمونوفلوروسنت به ترتیب جهت بررسی میزان تکثیر و نورونزایی در هیپوکمپ بررسی شد. علاوه بر این مرگ سلولی و نوروتوکسیسیتی با رنگ‌آمیزی Nissl ومیزان بیان ژن‌هایWnt/β-catenin, PI3K, Akt MAPK, ERK و GSK3β با استفاده ازReal-time RT-PCR مورد بررسی قرار گرفت. یافته‌ها: نتایج این تحقیق نشان داد که پروتئین آمیلوئید بتا می‌تواند یادگیری و حافظه فضایی را کاهش دهد. در حالی که تیمار با سوپرناتانت سلول‌های بنیادی عصبی موجب افزایش سلول‌های بنیادی عصبی در هیپوکمپ و تمایز نورونی آن‌ها گردید و نیز بیان ژن‌های Wnt/β-catenin, PI3K, Akt, MAPK, ERK را افزایش داد که نشان دهنده بهبود نورونزایی در این ناحیه است. علاوه بر این، بیان GSK3β و میزان مرگ سلولی افزایش یافته با تزریق پروتئین آمیلوئید بتا پس از تیمار با سوپرناتانت کاهش یافت.