بررسی تاثیر کورکومین کپسوله شده در میکروسفر کامپوزیتی بر تمایز استئوبلاستی سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از بافت چربی
چکیده
کورکومین، که به عنوان تومریک شناخته شده، یک ترکیب پلی¬فنولی جدا شده از ریزوم زردچوبه می-باشد. این ماده در گذشته برای درمان انورکسیا، مشکلات صفرا، سرفه، بیماری¬های کبدی و سینوزیت استفاده شده است. مطالعات اخیر رنج وسیعی از اثرات درمانی شامل خواص آنتی¬باکتریایی، ضدالتهابی، آنتی¬اکسیدانی در مدل¬های برون¬تنی (in vitro) و درون¬تنی(in vivo) و فعالیت¬های بیولوژیکی دیگر مانند آنتی¬روماتیک، ایمنی کبدی، التیام زخم، آنتی ویروسی، آنتی-HIV و سرکوب ترومبوزیس را نشان داده است. بنابراین، در مطالعه حاضر ما پارتیکل¬های توخالی مگنتیک سیلیکای مزوپورس rattle-type که ذرات Fe2O3 در هسته آن کپسوله شده و با لایه ای از PLGA پوشانده شد را به عنوان حامل کورکومین، به منظور دستیابی به بیومتریال¬های بهینه برای مهندسی بافت استخوان سنتز کردیم. ما فرض کردیم که ترکیب HMMS و PLGA می¬تواند پتانسیل زیست سازگاری و استئوژنیک کامپوزیت در مدل¬های برون¬تنی را بهبود بخشد. در نتیجه، سلول¬های بنیادی مزانشیمی مشتق از بافت چربی با HMMS-PLGA و HMMS-PLGA-Cur تیمار شدند و تکثیر و تمایز آنها مورد ارزیابی قرار گرفت.
مواد و روش¬ها: برای این منظور کورکومین بارگیری شده در HMMS-PLGA به روش پلیمریزاسیون سل-ژل سنتز گردید و توسط آنالیز های TEM، SEM، FT-IR و BET-BJH مشخصه یابی شد. پروفایل رهایش دارو از میکروسفرهای حاوی دارو، با انکوبه کردن میکروسفرها در محیط رهایش مطالعه گردید. به منظور تعیین سمیت HMMS-PLGA-Cur رو سلول¬های بنیادی مزانشیمی، تست فعالیت متابولیکی رنگ سنجی MTT بررسی شد. همچنین، تمایز استئوبلاستی سلول¬های بنیادی مزانشیمی تیمار شده با HMMS-PLGA-Cur ، توسط رنگ¬آمیزی آلیزارین قرمز، اندازه¬گیری فعالیت آلکالن فسفاتاز و سطوح بیان mRNA ی Osteonectin، Collagen1، BMP2، Osterix و RunX2 به کمک روش Real-time PCR بررسی گردید.
نتایج: مطالعات میکروسکوپی، بارگیری کورکومین در HMMS-PLGA به طور موفقیت¬آمیز تایید کرد. تست MTT تایید کرد که HMMS-PLGA-Cur فعالیت متابولیک سلول¬های بنیادی مزانشیمی را افزایش داد. داده¬های رنگ¬آمیزی آلیزارین قرمز، اندازه گیری فعالیت آلکالن فسفاتاز مرتبط با داده¬های تکنیک Real-time PCR بودند. این داده¬ها افزایش نرخ تمایز سلول¬های بنیادی مزانشیمی تیمار شده با HMMS-PLGA-Cur در 21 روز پس از انکوباسیون آشکار کرد.