| dc.contributor.author | مقدم, هستی | |
| dc.date.accessioned | 2021-10-11T06:29:07Z | |
| dc.date.available | 2021-10-11T06:29:07Z | |
| dc.date.issued | 1400 | en_US |
| dc.identifier.uri | http://dspace.tbzmed.ac.ir:8080/xmlui/handle/123456789/65207 | |
| dc.description.abstract | مقدمه: IGF-1 فاکتور رشد مهمی است که با ارتقا عمل هورمون رشد هیپوفیزی، رشد طولی و آنابولیک بدن
انسان را واسطه گری میکند. IGF-1 نوترکیب انسانی با نام ژنریک Mecasermin برای درمان طولانی مدت
اختلال رشد در کودکان با فقدان IGF-1 به کار می رود. به منظور استفاده از پروتئین نوترکیب انسانی IGF-1
برای مقاصد درمانی نیازمند تولید این پروتئین در مقیاس بالا هستیم. به منظور تعیین شرایط تولید ایده آل
پروتئین ها بایستی فاکتورهای متعددی از جمله شرایط بیان و القا، پروموتر، سویه باکتریایی و محلولیت پروتئین
را مورد بررسی قرار داد.
هدف: در این پروژه پایان نامه، بر آنیم پروموتر trc با پروموتر قوی تر T7 جایگزین کنیم و تأثیر شرایط القا و
بیان بر تولید IGF-1 نوترکیب در باکتری اشرشیاکلی بسنجیم.
روش کار: پس از تغییر پروموتر در کاست بیانی ، کلونینگ و بیان ژن سنتتیک IGF-1 را در سویه Shuffle
E. coli انجام شد. به منظور یافتن بهترین محیط کشت، باکتری ها در محیط های SB ، TB 2 ، xYT ،
SOB و SOC کشت داده شدند. آزمایش ابتدایی برای به دست آوردن بینش اولیه در مورد اثر غلظت IPTG
انجام شد.به منظور طراحی آزمایش مناسب برای تعیین غلظت مطلوب IPTG و زمان پس از القاء از روش
سطح پاسخ با استفاده از طرح مرکب مرکزی بهره جستیم.
یافته ها: بیشترین میزان زیست توده و rIGF-1 در باکتریهای رشد یافته در محیط SOB و SOC مشاهده
شد. افزایش غلظت IPTG از 4.0 میلی مولار به 4.0 میلی مولار و 1.2 میلی مولار منجر به میزان ببیشتری از
بیان پروتئین نوترکیب شد. در طراحی مرکب مرکزی، نقاط ستاره ای که 6 ساعت القا و غلظت 1 میلی مولار
IPTG بودند بیشترین بیان را در پی داشتند.
نتیجه گیری: در محیط کشت SOC ، غلظت متوسط IPTG و زمان القا تاثیر معنی داری بر بیان rIGF-1
دارند. | en_US |
| dc.language.iso | en | en_US |
| dc.publisher | دانشگاه علوم پزشکی تبریز، دانشکده داروسازی | en_US |
| dc.relation.isversionof | http://dspace.tbzmed.ac.ir:8080/xmlui/handle/123456789/65206 | en_US |
| dc.subject | فاکتور رشد انسولین مانند ۱ | en_US |
| dc.subject | غلظت IPTG | en_US |
| dc.subject | پروموتر | en_US |
| dc.subject | روش سطح پاسخ | en_US |
| dc.subject | زمان پس از القا | en_US |
| dc.subject | طراحی آزمایشها | en_US |
| dc.title | بررسی تاثیر شرایط القا و بیان تحت کنترل پروموتر T7 در تولیدIGF-1 نوترکیب در باکتری Escherichia coli | en_US |
| dc.type | Thesis | en_US |
| dc.contributor.supervisor | حیدری, حمیدرضا | |
| dc.contributor.supervisor | حجازی, محمد سعید | |
| dc.identifier.callno | 4184 | en_US |
| dc.description.discipline | داروسازی | en_US |
| dc.description.degree | دکترای عمومی | en_US |
