توسعه ی یک متد حساس برای تعیین مقدار مولکول مهارکننده ی STAT3، داروی استاتیک، توسط کروماتوگرافی مایع (HPLC)

Abstract

مقدمه: در دهه گذشته، پذیرش این نکته که STAT3 به عنوان یک هدف در درمان سرطان موثر است، باعث توسعه ترکیبات زیادی شده است که به نحوی مانع فعالیت STAT3 می شوند و یا از رونویسی ژن مربوطه جلوگیری می کنند. مثالی از مهار کننده های STAT3، مولکول کوچک غیر قطبی با نام تجاری استاتیک است که باعث مهار فسفریلاسیون و دیمریزه شدن STAT3 می شود. محدودیت استفاده بالینی از این ترکیب به علت محلولیت آبی بسیار پایین و فراهمی زیستی ناچیز است. هدف: در این پروژه برآنیم تا یک متد ساده و دقیق برای تعیین مقدار داروی استاتیک در نمونه های آبی و بیولوژیکی ارائه دهیم. روش کار: در این آزمایش، کروماتوگرافی فاز معکوس و ستون C18 به عنوان فاز ساکن و مخلوط 60% استونیتریل و 40% آب به عنوان فاز متحرک بکار رفت. همچنین متد مورد نظر با توجه به گایدلاین های FDA معتبرسازی شد. نتایج: متد توسعه یافته، در غلظت های بین 1 تا 40 میکروگرم بر میلی لیتر برای نمونه های آبی و نیز 2.5 تا 40 میکروگرم بر میلی لیتر برای نمونه های پلاسمایی، حالت خطی با ضریب همبستگی بالاتر از 0.999 نشان داد. دقت و صحت متد نیز در بازه ی مورد قبول 95-105% برای نمونه های آبی و 85-115% برای نمونه های پلاسمایی بدست آمد. حساسیت متد نیز بر اساس FDA، 1µg/ml و 2.5µg/ml به ترتیب برای نمونه های آبی و پلاسمایی و نیز مطابق گایدلاین های ICH، LOD= 1.3µg/ml و LOQ= 4.1µg/ml برای نمونه های آبی و نیز LOD= 1.5µg/ml و LOQ= 5µg/ml برای نمونه های پلاسمایی محاسبه گردید. نتیجه گیری: نتایج به دست آمده نشان می دهند که هر دو متد توسعه یافته به صورت جداگانه، متدهای سریع و دقیقی برای تعیین مقدار استاتیک در نمونه های آبی و بیولوژیکی هستند.