بررسی اثرات کلسی تونین بر بیان ژن های مرتبط با پذیرندگی رحم در اندومتر موشدرهنگام لانه گزینی
چکیده
در مطالعه حاضر اثرات كلسي تونين بر روی پذیرندگی اندومتر رحم با بررسی هیستوشیمیایی اندومتر و ژن هاي LIF،HAND2،Muc1،MSX.1،HB-EGFوLet-7a miRNAارزیابی شد.مسیر mTORوERK1/2نیز با استفاده از مهار کننده mTOR(PP242) موردبررسی قرار گرفت.
مواد و روش ها: 64 موش Bulb/c به دو گروه سیکل عادی تخمدان و تحریک تخمک گذاری تخمدان تقسیم شدند. هر گروه شامل 4 زیر گروه کنترل، کلسی تونین، PP242، کلسی تونین+PP242 بود.تزریق کلسی تونین –PP242 در صبح روز 4 حاملگی موش ها انجام شد و 24 ساعت بعد موش ها کشته شدند. بررسی هیستوشیمیاییبافت اندومتر رحم توسطرنگ آمیزی اختصاصی PASانجام شد.سپس سلول های اندومتر به روش مکانیکی جداسازی شدند و وسترن بلات وReal-Time PCR برای اندازه گیری پروتئین هاو ژن ها مورد استفاده قرار گرفت.
یافته ها: کلسی تونین باعث تغییر شکل اپی تلیوم به حالت مکعبی و تکثیر سلولی در استروما در هر دو گروه تحریک تخمک گذاری و عادیشد. همچنین PP242 در هر دو گروه باعث تغییر شکل اپی تلیوم لومینال به حالت استوانه ای شد. از طرفی،تحریک تخمک گذاریموجب افزایشp-mTOR و p-ERK1/2 و افزایش بیانmiRNA Let-7a گردید. کلسی تونین باعث افزایش بیان LIF، HAND2، HB-EGF، Msx.1و miRNA Let-7a در هر دو گروهودر گروهنرمال همچنین کلسی تونین موجب افزایش p-ERK1/2 شد.از طرفیPP242 موجب مهار پروتئین p-mTOR و p-4EBP1 در هر دو گروه و کاهش میزان بیان ژن های HB-EGFو Let-7aدر گروه تحریک تخمک گذاری و بدنبال آن افزایش p-ERK1/2 و Muc1 در این گروه شد.