طراحی ، همسانه سازی و بیان پپتید چنداپی توپی بر اساس آنتی ژن های افزایش بیان یافته سرطان پستان
چکیده
سرطان پستان به عنوان یکی از مهم‌‌ترین دلایل مرگ ناشی از سرطان در میان زنان دنیا است. بنابراین، یافتن یک درمان موثر برای سرطان پستان واقعا لازم است. ایمنی‌درمانی سرطان به عنوان یک رشته جدید نقش مهمی در درمان سرطان پستان دارد و در میان استراتژی‌های مختلف ایمنی‌درمانی سرطان، واکسن‌های پپتیدی نقش برجسته ای دارند. در طراحی واکسن برای سرطان القای ایمنی همورال و سلولار بایستی در نظر گرفته شود. دانش بیوانفورماتیک در طراحی واکسن‌های پپتیدی چند اپی توپی به کار برده می شود که به طور قابل‌توجهی سبب کاهش وقت و هزینه می شود. روش ها: در این پژوهش اپی‌توپ‌های CTL از پروتئین‌های آنتی‌ژنیک HER2، MUC1 و heparanase و اپی‌توپ‌های HTL از پروتئین survivin به وسیله سرورهای متعدد ایمونوانفورماتیک تعیین شدند. به منظور تحریک وسیع پاسخ ایمنی همورال و سلولار، پروتئین Por B از باکتری Neisseria meningitides که یکی از آگونیست‌های TLR2 است به عنوان محرک سیستم ایمنی در ساختار واکسن استفاده شد. واکسن پروتئینی طراحی شده شامل بخش خارج سلولی پروتئین MULT1 است که به گیرنده NKG2D با میل ترکیبی بالا اتصال می یابد و نقش کلیدی در تحریک پاسخ ایمنی ذاتی دارد. همه اجزای سازنده واکسن با لینکرهای اسیدآمینه‌ای عملکردی و ساختاری به هم متصل شدند و در نهایت واکسن پروتئینی طراحی شده در میزبان باکتریایی E. coli همسانه، بیان و واکسن تولیدی بوسیله ستون کروماتوگرافی میل ترکیبی Ni-NTA خالص‌سازی شد. یافته ها: واکسن پروتئینی طراحی شده در ژل الکتروفورز شناسایی و بیان آن بوسیله لکه گذاری وسترن تایید شد.