بررسی پاسخ سلول های B انسانی به اگزوزوم های مترشحه از سلول های سرطان پستان تیمار شده با کوردیسپین

Abstract

سرطان پستان بر اساس میزان بروز و مرگ و میر آن به ویژه در زنان یکی از مهم ترین سرطان ها است. یکی از مکانیسم‌های پیشرفت سرطان، مهار پاسخ‌های ایمنی سلول‌های سرطانی از طریق آزادسازی اگزوزوم‌ها است که در شرایط متاستاتیک بیشتر خواهد بود. هدف: در این مطالعه پاسخ سلول های B انسانی به اگزوزوم های مترشحه از سلول های سرطان پستان تیمار شده با کوردیسپین مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش کار: رده سلولی MDA-MB-231 در محیط کشت RPMI1640 کشت داده می شود. یک گروه از سلول ها با کوردیسپین تیمار شدند و حلال دیگری به گروه دیگر اضافه شد. پس از 24 ساعت، مایع رویی از سلول ها جدا شده و اگزوزوم های آن ها با استفاده از اولتراسانتریفیوژ خالص سازی می شود. میکروسکوپ الکترونی و تصویربرداری DLS برای تایید استخراج اگزوزوم استفاده خواهد شد. به موازات آن، سلول های راجی کشت داده می شوند و اگزوزوم های استخراج شده در مقادیر مختلف تحت تأثیر قرار می گیرند و روش MTT برای تکثیر سلولی مورد بررسی قرار می گیرد. نسبت بیان ژن‌های آپوپتوز و ضد آپوپتوز در این سلول‌ها با روش Real-time PCR تعیین می‌شود. فلوسیتومتری برای تعیین بیان نشانگر CD19 انجام می شود. یافته ها: اگزوزوم های استخراج شده از سلول های سرطانی پستان تیمار شده با کوردیسپین موجب کاهش تکثیر سلول های Raji گشته، هم‌چنین بیان ژن Bcl-2 را کاهش داده و بیان ژن BAX را به میزان قاب توجهی افزایش داد، و روی بیان مارکر CD19 افزایش ناچیزی گذاشت.