بررسی اثر کاهش بیان ژن SLC16A13 بر آپوپتوز و متاستاز در لاین سلولی سرطان ریه
چکیده
سرطان ریه به عنوان یکی از شایع ترین سرطانها در جهان با آمار مرگ و میر بسیار بالا است که دارای زیر رده های پاتولوژیک متفاوت است در این میان NSCLC شایع ترین فرم این بدخیمی می باشد. پاتوژنز پیچیده این بیماری سبب شده که درمان این بیماری در مراحل پیشرفته با مشکلات فراوانی همراه باشد. اخیرا ژنهای درگیر در متابولیسم به ویژه کدکننده های پروتیین های ناقل غشایی (The solute carrier )در سرطان مورد توجه قرار گرفته است.با توجه به نقش مهمشان در هموستاز سلولها به عنوان هدفهای احتمالی درمان در بدخیمی های مختلف به خصوص ریه مورد توجه قرار گرفته اند. SLC16A عضوی از خانواده ناقل های غشایی است که اهمیت آن در پیشبرد سرطان در سالهای اخیر آشکار شده است. در مطالعه حاضر اقدام به ناک داون بیان ژن13 SLC16A در رده سلولی سرطان ریه(A549) گرفتیم تا تاثیر کاهش بیان این ژن در توانایی بقا ، رشد و متاستاز در این سلول ها را مورد بررسی قرار دهیم.
روش¬ها: ابتدا رده های سلولی سرطان ریه، (A549) در محیط استاندارد کشت داده و سپس برای کاهش بیان ژن هدف si-RNA سنتتیک ضدژن SLC16A13به سلولهای هدف مورد بررسی ترانسفکت گردید. سپس برای بررسی تاثیر اثر کاهش بیان ژن مورد مطالعه بر روند مرگ سلولی و آپوپتوز از تست های MTT و فلوسایتومتری استفاده کردیم. برای بررسی نقش این تیمار بر روی توانایی مهاجرت سلول های سرطانی نیز ازتست SCRATCH استفاده شد. همچنین تاثیر این تیمار بر تغییر بیان ژن هدف با تست western blot و Real Time PCR موردآنالیز قرار خواهد گرفت. درنهایت تغییرات بیان ژنهای درگیر در آپوپتوز و مهاجرت سلولی نیز با روش Real Time PCR ارزیابی قرار گرفت.
یافته ها: طبق نتایج به دست آمده از بررسی حاضر کاهش بیان ژن SLC16A13 باعث افزایش در میزان آپوپتوز در سلولها ی سرطانی ریه می شوداما تغییری در توانایی مهاجرت سلولهای سرطانی ایجاد نمی کند.