بررسی فرسودگی لنفوسیت های T helper خون محیطی بیماران دریافت کننده آلوگرافت کلیه

Abstract

مولکول TIGIT یک مولکول کمک مهاری بیان شونده بر روی سلول های T و NK است که لیگاند اصلی آن مولکول CD155 (Polio Virus Receptor) می باشد. سیگنالینگ این مولکول یک تنظیم کننده منفی عملکرد لنفوسیت های T می باشد و از طریق غیر فعال سازی سیگنالینگ های فعال سلولی و تاثیر بر متابولیسم سلولی، موجب فرسودگی پاسخ های ایمنی می گردد. با توجه به اهمیت مولکول های ذکر شده در تولرانس بر علیه آلوگرافت ها و نیز مشخص نبودن نقش این مولکول ها در موارد انسانی ایجاد تولرانس نسبت به آلوگرافت کلیه، هدف این مطالعه تعیین ارتباط احتمالی بیان مولکول های ذکر شده در لنفوسیت های T خون محیطی بیماران پیوندی با عملکرد کلیه پیوندی می باشد. همچنین ارتباط ایمونولوژیک تفاوت های نسبی مشاهده شده در پذیرش آلوگرافت کلیه در دریافت کنندگان مختلف بررسی خواهد گردید. روش کار: به منظور بررسی مارکرهای PD-1 و TIGIT بر روی سلول های TCD4+ و TCD8+، خون هپارینه دریافت شده از دریافت کنندگان پیوند بصورت لوله های زیر بصورت فلوسایتومتری 3 رنگ برای هرکدام از مارکرهای PD-1 و TIGIT، رنگ آمیزی می گردد. رسوب سلولی قبل از آنالیز فلوسایتومتری بوسیله محلول لیز RBC، RBCs نمونه خونی از بین می رود و بوسیله دستگاه فلوسایتومتری با توجه به کنترل های موجود خوانش گردید. درصد و MFI مارکرهای PD-1 و TIGIT بر روی سلول های TCD4+ و TCD8+ خوانش گردید. سطح سرمی کراتینین و BUN نمونه های دریافت شده بوسیله کیت های کالریمتریک تجاری اندازه گیری می گردد. ارتباط بیان مارکرهای موردمطالعه و سطح سایتوکاین ها با سطح کراتینین و BUN بیماران مورد مطالعه از طریق آزمون همبستگی تعیین گردید. یافته ها: درصد بالاتری از سلول های T helper بیان کننده PD-1 (CD4+, PD-1+) در خون محیطی بیماران با سطوح کراتین زیر 2 مشاهده شد(003/0=P)؛ بیان PD-1 و TIGIT و نیز درصد سلول های CD4+, TIGIT+ همبستگی معنی داری با سطح کراتینین سرم در بیماران پیوندی نداشتند،درحالی که درصد سلول های CD4+, PD-1+ در این بیماران یک همبستگی معکوس معنی دار با سطح کراتینین نشان داد(59/0-=r و 001/0˂P).