بررسی بیان تغییرات متیلاسیون و بیان ژن CDKN2A و ارتباط آن با تغییرات بیان در ژن های CDK-4 و CDK-6 در بافت توموری و حاشیه تومور بیماران مبتلا به سرطان تیرویید

Abstract

سرطان تیروئید شایع ترین بدخیمی غدد درون ریز در سراسر جهان می باشد.شایع ترین نوع این بیماری زیر گروه پاپیلاری است. مانند سایر سرطانهای شایع این بدخیمی نیز در اثر تغییرات در مکانیسمهای مولکولی سلولهای نرمال مانند چرخه سلولی ، مهاجرت و مرگ سلولی ایجاد می شود .کینازهای وابسته به سایکلین مانند CDK-4وCDK-6 دو تنظیم کننده عمده چرخه سلولی می باشند. CDKN2A یکی دیگر از ژنهای درگیر در روند چرخه سلولی است که مانع عملکرد کینازهای وابسته به سایکلین می شود با توجه به اهمیت چرخه سلولی در روند سرطان زایی در مطالعه حاضر، به بررسی تغییر سطح بیان ژنهای CDK-4 و CDK-6 در نمونه های بافتی بیماران مبتلا به سرطان تیروئید و ارتباط آنها با میزان بیان و متیلاسیون ژن CDKN2A پرداخته شد. روش¬ها: در این مطالعه 50 بیمار مبتلا به سرطان تیروئید با کسب رضایت نامه آگاهانه وارد مطالعه شدند. تغییرات بیان ژن هایCDK-4 ، CDKN2Aو CDK-6با روش qRT-PCRبررسی شد. برای بررسی میزان متیلاسیون ژن CDKN2A متیلاسیون ناحیه مورد نظر از روش Methylation-Sensitive High Resolution Melting (ms-HRM) بهره بردیم. در آزمون های آماری 05/0Pvalue< معنی دار تلقی شد. یافته ها: در مورد بیان ژن ها، تغییرات بیان هر سه ژن مورد بررسی درنمونه های توموری با نمونه های مارژین معنی دار بود. در این بین CDK-4 و CDK-6 دارای افزایش بیان و CDKN2A دارای کاهش بیان در نمونه های توموری نسبت به نمونه های مارژین بود. ضمن اینکه در بافت توموری، میزان بیان ژن CDKN2A با بیان هر کدام از ژن های CDK4 و CDK6 دارای همبستگی منفی بود و میزان بیان دو ژن CDK4 و CDK6 نسبت به یکدیگر دارای همبستگی مثبت بود. از طرفی میزان متیلاسیون ژن CDKN2A در نمونه های توموری نسبت به نمونه های مارژین بیشتر بود که می تواند دلیلی بر تغییرات بیان آن باشد. ضمن اینکه تغییرات متیلاسیون ژن CDKN2A نسبت به میزان بیان این ژن، دارای همبستگی منفی با هم بودند. همچنین آنالیزهای مربوط به ROC curve مشخص کرد که بیان هر سه ژن و متیلاسیون ژن CDKN2A می تواند به عنوان هدف درمانی یا بیومارکر در سرطان تیروئید مورد استفاده قرار گیرد. به علاوه طبق یافته های بررسی ما تغییرات با برخی شاخص های کلینیکوپاتولوژیک بیماران شامل متاستاز به غدد لنفاوی و متاستاز دوردست بیماری مرتبط است.