مطالعه پتانسیل ترمیمی اسکافولد زیست سازگار کیتوزان-آلجینات حاوی مواد بیولوژیک آلفا توکوفرول و آسکوربیک اسید سید شده با سلولهای استرومال مغز استخوان در شرایط هایپوکسی بر روی زخم پوستی

Abstract

مقدمه: داربست های هیدروژلی به طور عمده برای مهندسی بافت پوست به کار می‌روند. مطالعات نشان داده‌اند که کیتوزان، آلجینات، آسکوربیک اسید و آلفاتوکوفرول در بهبود زخم نقش بسیار موثری ایفا می¬کنند. اسید اسکوربیک و آلفاتوکوفرول، با افزایش واسطه‌های ترمیمی، ظرفیت چشمگیری در تسریع فرآیند بهبود زخم ایفا می‌کنند. به علاوه، قرار دادن سلول‌های بنیادی مزانشیمی در شرایط هیپوکسیک، قابلیت درمانی آن¬ها را تقویت می‌کند. هدف مطالعه حاضر بررسی پتانسیل ترمیمی هیدروژل کامپوزیت کیتوزان/آلجینات بارگذاری شده با اسید اسکوربیک- آلفاتوکوفرول حاوی سلول‌های بنیادی مزانشیمی هیپوکسیک به عنوان یک جایگزین امیدوارکننده در بهبود زخم می‌باشد. روش کار: در ابتدا هیدروژل کیتوزان / آلجینات با اسید اسکوربیک و آلفا توکوفرول تهیه شدند. سپس خواص فیزیکوشیمیایی آن¬ها مانند تورم، میزان تخریب، ترشوندگی و FTIR مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. در مرحله بعد سلول¬های MSC بر روی سطح داربست کاشته شدند و سمیت سازه¬ها با استفاده از روش MTT مورد بررسی قرار گرفت. در ادامه به منظور انجام مطالعات درون تن، قطعات داربست برروی زخم پوستی ایجاد شده در مدل حیوانی قرار داده شدند. پس از گذشت 7، 14 و21 از جراحی، موش‌ها کشته شده و نمونه‌های پوستی برداشته شده و تحت رنگ‌آمیزی هماتوکسیلین-ائوزین قرار گرفتند. یافته¬ها: نتایج نشان¬دادند که هیدروژل‌های کامپوزیتی تهیه‌شده بسیار متخلخل با منافذ به¬هم پیوسته تشکیل دادند و همچنین زیست تخریب¬پذیر بودند. بر اساس تست‌های ترشوندگی و همولیز، داربست¬ها آب¬دوست و سازگار با خون بودند. علاوه بر این، نتایج حاصل از روش MTT و رنگ‌آمیزی¬های DAPI و H&E نیز نشان¬دادند که هیدروژل‌های تهیه‌شده بستر مناسبی برای رشد و تکثیر سلولی فراهم می‌کنند. در نهایت، بر اساس نتایج RT-PCR، افزایش سطح بیان VEGF-A و TGF-β1 در سلول¬های بنیادی هایپوکسیک کشت¬شده بر روی هیدروژل¬ها مشاهده شد. نتایج مطالعات درون¬تنی نشان¬داد که میزان بسته شدن زخم در گروه¬های تیمار با هیدروژل کامپوزیتی بالاتر بود و همچنین بالاترین میزان ترمیم زخم در گروه H-CA/AA/TP مشاهده شد. نتیجه¬گیری: در یک جمع¬بندی کلی می¬توان بیان کرد که هیدروژل¬های کامپوزیتی کیتوزان-آلجینات همراه با AA ، TP و MSCهای هیپوکسیک، می¬توانند به طور موثری در درمان آسیب¬های پوستی در بالین مورد استفاده قرار گیرند.