توسعه روش استخراج فازجامد پخشی القاشده با pH به منظور استخراج داروی فاویپیراویر از نمونه های بیولوژیکی و اندازه گیری آن با الکتروفورز مویینه
Abstract
مقدمه: آنالیز داروها در نمونه های حقیقی به دلیل پیچیدگی ماتریس آن ها و غلظت پایین داروها، نمی‌تواند مستقیماً صورت بگیرد و نیازمند اجرای روش های آماده سازی است. دراین تحقیق از روش فاز جامد پخشی هموژن القاشده با pH به منظور استخراج فاویپیراویر از نمونه های پلاسما و ادرار و حذف عوامل مداخله کننده استفاده شد. آنالیز دارو با استفاده از دستگاه الکتروفورزمویینه صورت گرفت. جاذب مورداستفاده بیوتین بود که سازگار با محیط زیست و ازلحاظ شیمی سبز، جاذب سبز می باشد. هدف: توسعه روش استخراج فاز جامد پخشی القا شده با pH جهت استخراج فاویپیراویر از نمونه های ادرار و پلاسمای اسپایک شده و اندازه گیری آن با الکتروفورزمویینه.روش کار: 5 میلی لیتر نمونه بیولوژیکی (پس از پروتئین گیری و رقیق سازی) به لوله آزمایشی منتقل شد و pH آن با استفاده از بافربورات در 9 تنظیم شد. پس از انحلال 125/0 گرم سدیم-کلراید (معادل 5/2درصد وزنی- حجمی) در محلول آزمایشی، 25 میلی گرم بیوتین در محلول آزمایشی حل شد. سپس 300 میکرولیتر محلول هیدروکلریک اسید (به غلظت 5/0 مولار) به محلول آزمایشی اضافه شد. طی این عمل حلالیت جاذب کاهش یافته و به صورت ذرات ریزی در محلول پخش می گردد. برای افزایش سطح تماس جاذب، مخلوط به مدت 1دقیقه اولتراسونیک سپس به مدت 10دقیقه با سرعت 4000 دوربردقیقه سانتریفیوژشد. محلول رویی دور ریخته شده و 100 میکرولیتر استونیتریل به عنوان حلال واجذبی بر روی جاذب اضافه شده و 3 دقیقه اولتراسونیک سپس 10 دقیقه سانتریفیوژ شده و مایع رویی با 100 میکرولیتر بافر 05/0 مولار بورات مخلوط شد. در نهایت مخلوط پس از فیلترکردن به دستگاه الکتروفورزمویینه تزریق شد.نتایج: تحت شرایط بهینه، مقادیر حد تشخیص و حد کمی سازی برای فاویپیراویر در نمونه پلاسما به ترتیب برابر 60 و 200 نانوگرم بر میلی‌لیتر بدست آمد. انحراف استاندارد نسبی زیر 2/8 % حاصل شد.نتیجه گیری: روش توسعه یافته روشی آسان و کارآمد برای استخراج آنالیت است. آنالیز نمونه‌های پلاسما و ادرار با روش پیشنهادی قابل انجام است و صحت و دقت قابل قبول آن، نشان می دهد که روش می تواند در مطالعات هم سنگی و بیوفارمسی به منظور تعیین پروفایل غلظتی فاویپیراویر کاربرد داشته باشد.