بررسی نقش ژن ریتم شبانه روزی timeless در پیشرفت سرطان معده
چکیده
Timeless یک ژن شبانه روزی است که در عملکردهای سلولی متنوعی مانند تنظیم ژن های شبانه روزی و تقسیم سلولی نقش دارد. اختلال در تنظیم این ژن با بیماری های مختلفی از جمله سرطان مرتبط است. نقش ژن Timeless در سرطان معده ارزیابی نشده است. بنابراین، این مطالعه با هدف بررسی بیان ژن Timeless در نمونه های بیوپسی سرطان معده و همچنین نقش آن در پاتوژنز سرطان معده در شرایط سلولی انجام شد.
مواد و روش ها. RNA کل از 45 نمونه بیوپسی سرطان معده و 40 نمونه که از نظر سرطان منفی بودند، استخراج و میزان بیان ترنسکریپت Timeless توسط qRT-PCR اندازه گیری شد. علاوه بر این، تجزیه و تحلیل از دست دادن عملکرد ژن Timeless با استفاده از الیگو siRNA های ضد Timeless برای ارزیابی اثر این ژن بر رده سلولی آدنوکارسینوم معده (AGS) انجام شد. از روش MTT و آنالیز چرخه سلولی برای ارزیابی تکثیر و آپوپتوز سلول های ترانسفکت شده و کنترل استفاده شد. روش التیام زخم برای مطالعه مهاجرت سلول های سرطانی پس از هدف گیری ژن Timeless مورد استفاده قرار گرفت. در نهایت میزان آپوپتوز سلول های مورد مطالعه ارزیابی شد.
نتایج. سطوح بالایی از mRNA Timelessدر بیوپسی‌های سرطان معده در مقایسه با نمونه‌های منفی تومور شناسایی شد. اما این تفاوت از نظر آماری معنی دار نبود (05/0p> ). کاهش میزان بیان Timeless در سلول های AGS سرعت تکثیر و تهاجم سلول های بدخیم را کاهش داد و منجر به افزایش آپوپتوز در این سلول ها گردید (p< 0.01).