بررسی بیان ژن P38 و متیلاسیون پروموتور این ژن در نمونه های توموری و مارژین بیماران مبتلا به سرطان حنجره
چکیده
سرطان حنجره یکی از شایع ترین سرطان ها با میزان مرگ ومیر بالا است. پروتئین کینازهای فعال شده با میتوژن p38 دسته ای از پروتئین کینازهای فعال شده با میتوژن (MAPK) هستند که به محرک های استرس مانند سیتوکین ها، تابش اشعه ماوراء بنفش، شوک حرارتی و شوک اسمزی پاسخ می دهند و در تمایز سلولی، آپوپتوز و اتوفاژی نقش دارند. بر این اساس، افزایش بیان p38 در تومورها و رده های سلولی سرطانی مختلف مشاهده شده است. در این مطالعه میزان بیان این ژن و متیلاسیون آن در بیماران مبتلا به سرطان حنجره و رابطه آنها با متغیرهای سن، استعمال دخانیات، سابقه خانوادگی، Stage و متاستاز بررسی شده است.
مواد و روش ها
در این پژوهش 50 عدد نمونه از بافت تومور و 50 عدد نمونه حاشیه تومور بیماران مبتلا به سرطان حنجره مورد بررسی قرار گرفت. پس از استخراج RNA (بوسیله ترایزول) از بافتها، سنتز cDNA انجام گرفت و از آن برای ارزیابی تغییرات بیان ژن p38 بوسیله Real Time PCR استفاده گردید. همچنین، استخراج DNA از نمونه های بافتی انجام گرفت و بررسی الگوی متیلاسیون نواحی پروموتری p38 با استفاده از تیمار bisulfite انجام گرفت. آنالیز آماری برای بررسی تغییرات بیان و متیلاسیون ژن p38 و اثرات آنها بر روی مشخصات کلینیکال بیماران انجام گرفت و pvalue<0.05 به عنوان سطح معنی داری در نظر گرفته شد.
نتایج
نتایج بدست آمده مشخص کرد که ارتباط معنی دار بین میزان بیان ژن p38 در بافت سرطانی و بافت سالم وجود دارد، بطوریکه بیان ژن p38 در بافت های سرطان حنجره از بافت های حاشیه تومور بیشتر است. همچنین متیلاسیون در بافت های سرطان حنجره به وضوح کمتر از بافت های سالم است.