بررسی تاثیر تزریق وریدی c-kit+ بر روند آپوپتوز در بافت کلیه از طریق مسیر سیگنالینگ PI3K/Akt/GSK 3β و بیان Bax ،Caspase 3 و Bcl2 در رتهای نر دیابتیک نوع 2
Abstract
استفاده از سلولهای بنیادی به عنوان روش درمانی نوینی در نفروپاتی دیابتی مطرح شده است. لذا در این مطالعه بر آن شدیم که به بررسی تاثیر تزریق وریدی سلولهای بنیادی c-kit+ استخراج شده از مغز استخوان رتها بر نفروپاتی دیابتی در رتهای نر دیابتیک نوع دو با تمرکز بر مسیر سیگنالینگ PI3K/Akt/GSK 3β و آپوپتوز بپردازیم.
روش کار: 28 رت نر طبق گروههای زیر مورد بررسی قرار گرفت: ۱) گروه کنترل ۲) گروه دیابتی ۳) گروه دیابتی با دریافت حدود 50 میکرولیتر بافر فسفات حاوی 3×105 –عدد سلول c-kit+ ۴) گروه دیابتی با دریافت حدود 50 میکرولیتر بافر فسفات حاوی 3×105 –عدد سلول c-kit-. گروه کنترل و دیابتی حدود 50 میکرولیتر بافر فسفات دریافت نمودند. پس از اتمام مداخلات و القای بیهوشی عمیق، کلیه چپ جهت بررسی آپوپتوز و کلیه راست برای تعیین میزان پروتئین های PI3K، Akt،GSK 3β ، Bax ، Bcl2 و Caspase 3 به روش وسترن بلات خارج گردیده و فریز شدند.
یافته¬ها: درمان با سلولهای c-kit+ باعث کاهش آپوپتوز در کلیه گردید که با کاهش التهاب و کاهش سطح TNF-α و IL-6 در بافت کلیه مرتبط بود. علاوه بر این سلولهای c-kit+ میزان PI3K، pAKT و GSK-3βرا که در شرایط دیابتیک کاهش یافته بود، افزایش داد. همچنین آپوپتوز کلیه پس از درمان با c-kit+ ضمن افزایش بیان Bcl-2 و کاهش سطح Bax و Caspase-3 ، کاهش یافت.