بررسی بيان تغییرات متیلاسیون و بیان ژن RASSF2 آن در بافت توموری و حاشیه تومور بیماران مبتلا به سرطان تیروئید

Abstract

سرطان تیروئید به عنوان یکی از شایعترین سرطان در بین هر دو جنس مذکر و مونث می باشد. یکی از مهمترین تغییرات شناخته شده در روند انواع بدخیمی به خصوص سرطان تیروئید تغییرات اپی ژنتیکی در سطح متیلاسیون DNA است که با تغییر بیان ژنهای مختلف درگیر در روند کارسینوژنز همراه است. خانواده پروتیینی RAS از جمله شناخته شده ترین انکوژنها هستند این GTPase ها نقش کلیدی در ایجاد و پیشرفت سرطان دارند. خانواده پروتنینی RASSF (Ras Association Domain Family Members) از جمله مهمترین سرکوب کننده های خانواده Ras GTPase که به واسطه عملکرد خود در گروه ژنهای سرکوبگر تومور قرار می گیرند. RASSF2 یکی از اعضا مهم این خانواده پروتیینی 10 عضوی است. مطالعات In vitro پیشتر نقش این ژن را در مهار رشد سلولی و القا آپوپتوز را به اثبات رسانده است.در این مطالعه میزان بیان این ژن و متیلاسیون آن در بیماران مبتلا به سرطان تیروئید و رابطه آنها با متغیرهای بالینی بیماران مورد بررسی قرار گرفت. روش انجام کار: در این پژوهش 50 نمونه از بافت تومور و 50 نمونه حاشیه تومور بیماران مبتلا به سرطان تیروئید از همان بیماران جمع آوری شد. سپس برای ارزیابی بیان ژنها ابتدا RNA از بافتها استخراج ، و پس از سنتز cDNA از آن برای بررسی تغییرات بیان ژن RASSF2 بوسیله Real Time PCR استفاده گردید. در قسمت دوم بررسی نیز ابتدا DNA ها استخراج و بعد از تیمار bisulfite و میزان متیلاسیون ژن مورد بررسی با روش نیمه کمی MS-HRM انجام گرفت. در این بررسی در تمام آزمونهای آماری pvalue<0.05 به عنوان سطح معنی داری در نظر گرفته شد. نتایج: طبق نتایج به دست آمده از بررسی حاضر میزان متیلاسیون ژن RASSF2 در نمونه های توموری نسبت به نمونه های سالم دارای افزایش معنی دار بوده است از طرف دیگر میزان بیان ژن مورد نظر در نمونه های توموری نسبت به نمونه های سالم دارای کاهش معنی دار بود. همچنین تغییرات بیان و متیلاسیون این ژن با برخی ویژگی های پاتولوژیک بیماران مثل متاستاز نیز دارای ارتباط بود. همچنین نتایج حاصل از ROC curve برای بیان ژن مورد نظر نشان داد که بیان و متیلاسیون این دارای ارزش بیومارکری در افتراق نمونه های توموری از نمونه های سالم است.