بررسی تاثیر خاموش کردن PDL-1 بر روی رشد و تکثیر در سرطان کلیه

Abstract

سرطان کلیه در واقع سرطانی است که از کلیه‌ها شروع می‌شود. کلیه‌های شما دو عضو لوبیایی شکل هستند که اندازه هر یک از آن‌ها تقریبا اندازه مشت شما است. آن‌ها در پشت اندام‌های شکمی قرار دارند، بنابراین یک کلیه در هر طرف ستون فقرات وجود دارد. در بزرگسالان، سرطان سلول کلیوی (Renal cell carcinoma) شایع‌ترین نوع سرطان کلیه است. کودکان خردسال به احتمال زیاد به نوعی سرطان کلیه به نام تومور ویلمز (Wilms’ Tumor) مبتلا می‌شوند. بیان بالای PDL-1 توسط سلول های سرطانی شناخته شده است. از آنجایی که عوارض آنتی بادی علیه PD1-PDL-1 شناخته شده است بنابراین روش های درمانی جایگزین مثل siRNA برای سرکوب ژن خاصی میتواند انجام شود.در این مطالعه هدف آن است که با استفاده از siRNA اختصاصی، بیان ژن های PDL-1 سرکوب شده و تاثیر این سرکوب همزمان بر رشد ، مهاجرت و آپوپتوز سلول های سرطانی ارزیابی گردد. مواد و روش ها: ابتدا رده سلولی (ACHN) کشت داده شد . سپس siRNA اختصاصی ژن PDL-1 به رده ی سلولی مورد نظر ترانسفکت شد. جهت بررسی اثر سایتوتوکسیک siRNA منتقل شده تست MTT انجام گرفت. جهت بررسی این سرکوب ژنی بر میزان رشد و تکثیر سلول های سرطانی، ژن های دخیل در رشد ، تکثیر و متاستاز (C-myc,Ki67,BCL-2 ,MMP9 ) به روش PCR-RT مورد بررسی قرار گرفت. پس از جمع آوری داده ها در نرم افزار Excell ، سازمان دهی داده ها انجام شد و سپس با استفاده از نرم افزار prism توزیع داده ها بررسی شده و برای توزیع نرمال از آزمون Test-T و برای داده های با توزیع غیر نرمال از آزمون whitney-Mann استفاده شد. یافته ها: در رده سلولی سرطانی کلیه افزایش معنی داری از بیان PDL-1 را مشاهده کردیم. در مقایسه با گروه کنترل نتایج ما بطور معناداری فراوانی کاهش یافته ژن های دخیل در متاستاز و مهاجرت سلولی مثل,Ki67, MMP9, BCL-2 و C-myc بعد از اضافه کردن siRNA PDL-1 را نشان داد. همچنین داده های حاصل از MTT نشان داد که بعد از اضافه کردن PDL-1 siRNA میزان رشد و تکثیر سلول های سرطانی کاهش یافت.