بررسی تاثیر پوشش دهی microRNA155-5p بر روی ایمپلنت های تیتانیومی در تمایز سلول های بنیادی مزانشیمال مغز استخوان به استئوبلاست

Abstract

زمینه و هدف: امروزه استفاده از ایمپلنت های تیتانیومی برای جایگزینی دندان های از دست رفته در حال افزایش می باشد. تحقیقات برای یافتن روش های مختلف برای اصلاح سطح ایمپلنت جهت بهبود استئواینتگریشن ادامه دارد. بدین منظور در مطالعه حاضر سعی در طراحی پوششی برای تیتانیوم شده است که بتواند نیازهای لازم را تأمین نماید. یک فاکتور بسیار مهم در پوشش های بیواکتیو، داشتن خاصیت استئواینتگریشن است. MicroRNA ها مولکول های RNA کوتاهی هستند که پس از فرآیند رونویسی mRNA، بیان ژن را تنظیم می کنند. بیان افتراقی MicroRNA ها در طول تمایز استخوانی نقش ضروری این رونوشت ها را در تشکیل استخوان نشان می دهد. نتیجتا هدف این طرح کوت microRNA-155-5p بر سطح ایمپلنت تیتانیومی و بررسی اثر آن بر رده سلولی بنیادی مزانشیمال مغز اسخوان جهت افزایش استئواینتگریشن می باشد. مواد و روش اجرا: در مرحله اول microRNA-155-5p با پیوند های یونی در نانوذرات کیتوسان کپسوله شده و نانوکپسول های تولید شده توسط dynamic light scattering مورد بررسی قرار گرفتند. در مرحله بعد، 30 دیسک آلیاژ تیتانیومی به ضخامت 0.8 میلی متر تهیه شده و توسط کاغذ سیلیکون کارباید پالیش شده و با اسید و اتانول و استون شسته شدند. سپس کیتوسان به روش dip coating بر روی ایمپلنت های تیتاتیومی کوت شده و محصول بدست آمده با SEM شناسایی و تایید شد. جهت ارزیابی فعالیت استئوبلاستی، میزان آلکالین فسفاتاز ترشح شده به صورت رنگ سنجی ارزیابی شد. در مرحله بعد زیست سازگاری رده سلولی bone marrow mesenchymal stem cell توسط تست MTT ارزیابی گشت. یافته ها: نتایج آزمون DLS نشان داد که ابعاد نانوذرات کیتوسان فاقد miRNA 250 نانومتر بوده و پتانسیل زتای آن 28+ می باشد. میانگین شاخص ALP بین گروه ها اختلاف معناداری نشان داد. کمترین میانگین مربوط به گروه mir و بیشترین میانگین مربوط به گروه CS-miR بود. بررسی مقادیر زیست سازگاری نیز تفاوت معنی داری بین گروه ها نشان داد به صورتی که کمترین میانگین درصد سلول های زنده مربوط به گروه CS-miR و بیشترین میانگین مربوط به گروه miR بود. نتیجه گیری: دیسک تیتانیومی با پوشش نانوذرات کیتوسان حاوی microRNA155-5p دارای زیست سازگاری بالا بوده و ترشح آلکالین فسفاتاز را افزایش می دهد.