تشخیص microRNA499 بر پایه کاغذ با استفاده از پروب نانویی

Abstract

ابزارهای تشخیصی میکروسیال کاغذی از پتانسیل بسیار خوبی برای اجرای سنجش‌های شیمیایی و بیوشیمیایی برخوردار هستند. این ابزارهای تشخیصی چندین مزیت را ارائه می‌دهند، آنها ارزان‌قیمت، دارای ساخت و کارکرد آسان، یکبار مصرف و سازگار با انواع روش‌های تشخیص هستند. شیمی سلولز امکان تثبیت و پایداری معرف‌های زیست مولکولی، از جمله آنتی‌بادی‌ها، آنزیم‌ها، باکتریوفاژها و سلول‌ها را فراهم می‌کند. بستر کاغذی توسعه طیف گسترده‌ای از سنجش‌های تشخیصی را تسهیل می‌کنند که می‌توانند از روش‌های مختلفی برای انتقال سیگنال‌های قابل‌اندازه‌گیری مانند الکتروشیمیایی، فلورسنت و یا رنگ‌سنجی استفاده کنند. باتوجه‌به مزایای خوبی که پلتفرم‌های کاغذی ایجاد می‌کنند؛ ما به دنبال این هستیم تا میکروسیال کاغذی جهت شناسایی 499 microRNA به‌عنوان نشانگر بالقوه بیماری سکته قلبی تهیه کنیم. طراحی و ساخت این میکروسیال با استفاده ازپروب نانویی صورت خواهد گرفت و عملکرد آن بر مبنای ایجاد رنگ فلورسنت بر روی کاغذ حاصل از تعاملات هیبریدی بین پروب نانویی و miRNA هدف خواهد بود.این تغییر تصویربرداری شده و با استفاده از تجزیه‌وتحلیل ارتباط بین شدت رنگ و غلظت نمونه، امکان غلظت سنجی نمونه را فراهم خواهد کرد. روش مطالعه: پروب اختصاصی جهت شناسایی 499 microRNA توسط وب سرور طراحی و امکان‌سنجی شده به‌طوری‌که در قسمت ساقه پروب در سر ´5 فلوروفر قرار گرفته و توالی مکمل عنصر هدف در بخش حلقه وجود دارد. میکروسیال کاغذی طراحی شده و با استفاده از روش چاپ موم ساخته می‌شود. این پروب اختصاصی توسط نیروی الکترواستاتیک حاصل از سطح مثبت کاغذ و سطح منفی نانوذره و پروب بر روی بستر کاغذ تثبیت می‌شود. با افزودن غلظت‌های مختلف از عنصر نمونه بر روی میکروسیال کاغذی آماده شده فرایند هیبریداسیون انجام‌گرفته و باتوجه‌به افزایش شدت سیگنال فلورسانس حاصل از تغییرشکل پروب غلظت سنجی و ارزیابی انجام می‌شود. یافته‌ها: در این مطالعه یک میکروسیال مبتنی بر کاغذ برای تشخیص 499 microRNA طراحی شده و مورد ارزیابی قرار گرفته شده است. مطالعات انجام شده و تجزیه‌وتحلیل آماری حاکی از ویژگی و اختصاصیت مناسب 499 microRNA به‌عنوان نشانگر مناسب تشخیص سکته قلبی است. میکروسیال‌های مبتنی بر کاغذ دارای طراحی آسان و کم‌هزینه به‌عنوان یک تست POC مطرح بوده است .همچنین باتوجه‌به بررسی‌ها و آنالیز داده‌ها پروب طراحی شده از ویژگی‌های خوبی جهت تشخیص نشانگر موردنظر بر پایه فلورسانس برخوردار است. در این مطالعه کوچک‌ترین حد تشخیصی ما در حدود 0.34 پیکو مولار حاصل شده است که نسبت به مطالعات مشابه برای تشخیص microRNA بر روی بستر کاغذ بهبود پیدا کرده است.