مقایسه اثر لتروزول و کلسی تریول بر بیان ژنهای پذیرندگی رحم در کشت سه بعدی بافت اندومتر بیماران Repeated Implantation Failure RIF) )

Abstract

تعیین زمان دقیق پنجره لانه گزینی (WOI) در افراد مبتلا به RIF برای لانه گزینی موفق ضروری است. مطالعه حاضر با هدف مقایسه اثرات لتروزول و کلسیتریول و لتروزول به همراه کلسی تریول بر بیان نشانگرهایpro-implantaion(HOXA10, HOXA11,LIF, NR3C1, αVβ3, miR-30d) ونشانگرهایAnti-implantation (BCL6,miR-145,miR-23b, miR-494) در سلول‌های اپیتلیال آندومتر (EECS) بیماران RIF و همچنین زنان بارور سالم انجام شد. مواد و روش¬ها: بافت آندومتر از بیماران (N = 7) RIF و زنان سالم (N =7) در مرحله تکثیرتهیه شد. EEC ها از بافت آندومتر جداسازی شدند و توسط رنگ آمیزی ایمونوفلورسنت مشخصه یابی شدند. سپس سلولهای اپیتلیال در داربست فیبرینی در 10 گروه کشت داده شدند. سلول ها با لتروزول ،کلسیتریول و لتروزول به همراه کلسی تریول ، تیمار شدند. برای بررسی تکثیر و مهاجرت سلول ها در داربست، از رنگ آمیزی ایمونوفلورسانس،PAS و H&E استفاده شد و بیان mRNAهایHOXA10,HOXA11,LIF,NR3C1,BCL6,Integrin αv, و Integrin β3 و همچنین بیان miRNA های miR-145,miR-494,miR-30d,miR-23b با استفاده از Real-time PCR بررسی و مقایسه شد. یافته ها: این مطالعه نشان داد که سطح بیان ژن‌های پیش لانه گزینی (NR3C1،LIF HOXA10, miR-30d , HOXA11,Integrin αv,Integrin β3,) در بیماران RIF کمتر از زنان سالم بود و سطح بیان ژن‌های ضد لانه گزینی (BCL6،miR-145، miR-23b و miR-494) در بیماران RIF بیشتر از زنان سالم بود. در هر سه نوع درمان (لتروزول، کلسیتریول و درمان همزمان با لتروزول و کلسیتریول)، سطح بیان ژن‌های پیش‌لانه گزینی (HOXA10, HOXA11, Integrin αv,NR3C1,miR-30d) به جزLIF و Integrin β3 در بیماران RIF و زنان سالم افزایش یافت. علاوه بر این، در هر سه نوع درمان (لتروزول، کلسیتریول و درمان همزمان با لتروزول و کلسیتریول)، میزان بیان ژن‌های ضد لانه گزینی (miR-145 , miR-23b ,miR-494 و BCL6) در بیماران RIF و زنان سالم کاهش یافت.