بررسی تأثیر جایگزینی ژله وارتون آسلولار باFBS برالگوی تمایز اریتروئیدی و مگاکاریوسیتی سلول‌های CD34+ در هم کشتی با سلول های بنیادی مرانشیعی

Abstract

سلولهای بنیادی خونساز (HSCs CD34+)دارای توانايی خود نوسازی می باشند و قادر هستند به تمامی سلولهای مختلف خونی تمايز يابند. پیوند سلولهای بنیادی خونساز (HSCs) يک راهکار درمـانی مناسـب برای بسیاری از سرطان هـا، اختلالات خونی بدخیم و غیر بدخیم و اختلالات سیستم ايمنی است. اما عیب عمده استفاده از سلولهای بنیادی خونساز تعداد کم اين سلول ها است. بنابراين کاری که برای افزايش تعداد HSC انجام می شود تکثیر اين سلول ها در محیط آزمايشگاه (in vitro) است. برای تکثیر سلول ها از محیط کشت بر پايه سرم حیوانات بخصوص سرم جنین گاوی (FBS) استفاده می شود. ازآنجايیکه امروزه سلول های بنیادی خونساز (HSCsCD34 +)پیوند زده می شوند و علیرغم زدودن محیط های کشت و مواد آن ها از سلول ها، بازهم مقداری از اين مواد باقیمانده و به گیرنده پیوند تزريق میشوند و درصورتیکه منبع اين محیط ها حیوانی باشد باعث انتقال برخی بیماری ها و مشکلات ايمنی برای شخص پذيرنده می شوند، جايگزينی اين محیط ها با محیط های سالم حداقل با منبع انسانی امری ضروری است. ازجمله محیط هايی که میتوان به عنوان جايگزين برای سرم های حیوانی استفاده کرد، ژله وارتون آسلولار (AWJ )است. ژله وارتون آسلولار حاوی طیف وسیعی از فاکتورهای رشد شامل: فاکتور رشد مشتق از پلاکت(PDGF) ،فاکتور رشد اپیتلیال (EGF) ،فاکتور رشد فیبروبلاست بازی (bFGF) ،فاکتور رشد فیبروبلاست اسیدی (aFGF) ،فاکتور دگرگونی رشد بتا1β1-TGF) فاکتور رشد شبه انسولین (I-IGF) است. برای اين مولکولها روی سلولهای بنیادی خونساز و پیشسازهای رده های خونی گیرنده وجود دارد. تمام اين مولکول ها تکثیر و عملکرد سلولها را تحت تأثیر قرار می دهند و ممکن است تکثیر را نسبت به FBS تغییر دهند. مواد و روش بررسی: در این مطالعه، CD34+ HSC ‌های مشتق از خون بند ناف ، در حضور سایتوکاین SCF، TPO ,FLT3-L کشت و Expand داده شدند. سپس کشت CD34+ HSC Expand در دو گروه انجام شد: 1) محیط کشت IMDM حاوی10% FBS و100 ng/mlسایتوکائین ترومبوپویتین 2) محیط کشت IMDM حاوی 10% AWJ ، 100 ng/ml سایتوکائین ترومبوپویتین. در¬نهایت، با استفاده از روش¬های فلوسایتومتری و الگوی بیان مارکرهای مرتبط با رده مگاکاریوسیتی بر¬رسی شد. نتایج: میزان بیان مارکر اختصاصی رده مگاکاریوسیتی شامل CD41 در محیط کشت حاوی ژله وارتون آسلولار نسبت به گروه FBSافزایش داشت.