ارزیابی نقش سلولهای بنیادی مزانشیمال سالم و سلولهای بنیادی مزانشیمال حاصل از بیماران لوسمیک بر الگوی تمایز لنفوسیت‌های Th از پیش تحریک شده به Treg
Abstract
پس از شناسايي سلول¬هاي بنيادي مزانشيمي در سال 1970، مطالعات بسياري در زمينه ويژگي ايمونومدوليتوري و كاربرد آن¬ها در درمان بسياري از بيماري¬ها صورت گرفته است. این سلول¬ها از منابع مختلف: مغز استخوان، بافت چربي، خون بند¬ناف، جفت و مايع آمنيوتيك جدا می¬شوند و به صورت ذاتی با یکدیگر تفاوت¬هايی دارند.
هدف: هدف از اين مطالعه جداسازي و كشت سلول¬هاي بنيادي مزانشيمي از مغز استخوان افراد مبتلا به لوسمی و سلول¬هاي بنيادي مزانشيمي سالم و كشت همزمان آن¬ها با PBMC از پیش تحریک شده جدا شده از خون محیطی فرد سالم و مقایسه درصد تمایز لنفوسیت های CD4+ T به سمت سلولهای Treg بود.
روش كار و مواد: سلول¬هاي بنيادي مزانشيمي سالم و سلول¬هاي تك هسته¬اي خون مغزاستخوان افراد لوکمی جدا شده در محيط كشت DMEM داراي FBS 10% كشت داده شد. جهت تاييد ماهيّت مزانشيمي، ارزيابي فلوسايتومتري صورت پذيرفت. سلولهای تک هسته ای خون محیطی از فرد سالم جدا شد. سلولهای تک هسته ای قبل از همکشتی با سلولهای بنیادی مزانشیمی، در حضور فیتوهماگلوتینین کشت داده شد. سپس پس از کشت همزمان سلولهای بنیادی مزانشیمی سالم و سلولهای بنیادی مزانشیمی جدا شده از مغز استخوان بیمار مبتلا لوکمی با PBMC های از پیش تحریک شده، میزان درصد تمایز لنفوسیت های CD4+ T به سمت Treg توسط روش فلوسایتومتری ارزیابی شد.
یافته¬ها: سلول های بنیادی مزانشیمی حاصل از بیماران لوکمی از نظر ظاهری شبیه به سلول های بنیادی مزانشیمی سالم بود. درحالیکه سلول های بنیادی مزانشیمی حاصل از بیماران لوکمی نسبت به سلول بنیادی مزانشیمی سالم قدرت چسبندگی و تکثیر آهسته تری داشتند. ما نشان دادیم سلول های بنیادی مزانشیمی سالم باعث افزایش تمایز سلول های Treg از سلول های CD4+T در حین همکشتی با سلول های تک هسته ای خون محیطی می شود. همچنین داده ها نشان داد سلول های بنیادی مزانشیمی حاصل از بیماران لوکمی باعث افزایش تمایز سلول های Treg از سلول های CD4+T در حین همکشتی با سلول های تک هسته ای خون محیطی می شود. ما با مقایسه بین سلول های بنیادی مزانشیمی سالم و سلول های بنیادی مزانشیمی حاصل از بیمار لوکمی نشان دادیم که سلول های بنیادی مزانشیمی افراد لوکمی سلول های Treg بیشتری را از سلول های CD4+ Tتولید میکند و بنابراین باعث سرکوب سیستم ایمنی در برابر سلول های لوسمیک میشود.