سنتز و مشخصه یابی نانوژلهای هیبرید زیست تخریب پذیر پلی آکریلات – پلی استر حاوی PDGF به عنوان داربست قابل تزریق در ترمیم غضروف مفصلی

Abstract

مقدمه: فرآيند بازسازی آسيبهاي عضلاني-اسكلتي به دليل توانايي خودنوزايي ذاتي بسيار ضعيف بافت بالغ غضروفي به جهت فقدان عروق خوني و اعصاب، همواره از دغدغه هاي اصلی در زمينه پزشكي بازساختی بوده است. هدف: هدف از مطالعه حاضر، طراحی داربست هیدروژلی هیبریدی زیست تخریب پذیر حساس به دما جدید به عنوان بستری برای رشد، تکثیر و تمایز hASCs به بافت غضروفی در حضور PDGF_BB می باشد. روش کار: در این مطالعه داربست نانوهیدروژلی هیبریدی PCL-P(HEMA-NIPAAm) بر پایه پلی استر-آکریلات بارگذاری شده با فاکتور رشد تهیه شد. خواص فیزیکوشیمیایی داربست شامل LCST، خواص تورمی، تخریب هیدرولیتیکی، خواص مکانیکی، مورفولوژی و رهایش فاکتور رشد مورد بررسی قرار گرفت. سلولهای hASCs بعد از استخراج با فلوسایتومتری شناسایی شدند. چسبندگی و تکثیر سلولی بر روی داربست با روش SEM و MTT مورد ارزیابی قرار گرفت. میزان بیان ژنهای اختصاصی کندروسیت با RT-PCR بررسی شد.یافته ها: با توجه به نتایج LCDT (°C37)، S-2 برای سنجش های مختلف در شرایط in-vitro انتخاب گردید. تصویربرداری SEM ساختار نانوذراتی داربست را با اندازه منافذ 45±85 میکرومتر نشان داد. استحکام فشاری، مدول یانگ و کشش فشاری برای S-2 ( Mpa5/52، Mpa 7/0و 5/75%) بدست آمد. PDGF_BB یک رهش آهسته از داربست (90%) را نشان داد. داربست هیچ گونه سمیتی بعد از 14روز نداشته و شرایط تکثیر و چسبندگی سلولها را فراهم کرد. RT-PCR نشان داد که ترکیب داربست و PDGF_BB تمایز کندروژنیکی و بیان مارکرهای اختصاصی کندروسیت Aggrecan، Type-II Collagen، SOX-9 و Integrin β1 را در مقایسه با گروه کنترل ارتقا بخشید.نتیجه گیری: داربست نانو هیدروژلی PCL-P(HEMA-NIPAAm) حامل PDGF-BB به عنوان یک ماتریکس برای کشت hASCs یک سیستم ارزشمند می باشد که می تواند در آینده به عنوان یک ساختار سه بعدی در آسیب های غضروفی مورد استفاده قرار گیرد.