بر رشد، مهاجرت و آپوپتوز در رده سلولی اسکواموس سل کارسینوم دهانیPD-L1 بررسی اثر سرکوب بیان ژن

Abstract

مقدمه: امروزه در درمان سرطان اسکواموس سل کارسینوم، مهار ایمیون‌چک‌پوینت‌ها بسیار مورد توجه قرارگرفته است. PD-L1 مولکول مهاری تنظیم‌کننده‌ی سیستم ایمنی است که با بیان در سطح سلول‌های سرطانی، در کاهش عملکرد سلول‌های ایمنی نقش دارد. در این مطالعه هدف آن است که با استفاده از siRNA اختصاصی، بیان ژنPD-L1 سرکوب شده و تأثیر این سرکوب هم‌زمان بر رشد، مهاجرت و آپوپتوز سلول‌های سرطانی ارزیابی گردد.

هدف: هدف ما در این مطالعه بررسی اثر سرکوب بیان ژن PD-L1 بر رشد، مهاجرت و آپوپتوز در رده سلولی اسکواموس سل کارسینوم دهانیHN-5 است. روش کار: بدین منظور رده سلولی اسکواموس سل کارسینوم دهانی از نظر بیان PD-L1 بررسی شده و سپس از طریق siRNA اختصاصی ژن PD-L1 با روش الکتروپوریشن به رده‌ی سلولی مناسب انتقال یافت و با تست MTT اثر سایتوتوکسیک این سرکوب بررسی گشت. با ارزیابی فلوسایتومتری میزان آپوپتوز و تغییرات چرخه سلولی بررسی شد. مهاجرت رده‌ی سلولی با تست wound healing assayبررسی گردید و ژن‌های دخیل در القای آپوپتوز و مهاجرت سلولی نیز مورد بررسی قرار گرفت.

یافته ها: رده‌ی سلولی اسکواموس سل کارسینوم (HN-5) جهت مطالعه انتخاب شد. به دنبال سرکوب بیان ژن PD-L1 میزان تکثیر سلول‌های سرطانی کاهش یافت. از طرفی میزان آپوپتوز سلول‌های ترانسفکت شده نیز القا شد. از طرفی این سرکوب منجر به کاهش توانایی مهاجرت و توقف چرخه‌ی سلولی در فاز G1 گردید. میزان بیان ژن BAX افزایش، ژن BCL-2 کاهش، Cas9 افزایش و ژن C-Myc کاهش داشت.

نتیجه گیری: نتایج حاصل از مطالعه انجام‌شده نشان داد که سرکوب ژن PD-L1 بر رشد و مهاجرت سلول‌های سرطانی مؤثر می‌باشد. بنابراین به نظر می‌رسد سرکوب این ایمیون‌چک‌پوینت می‌تواند رویکرد جدیدی در درمان سرطان اسکواموس سل کارسینوم دهانی باشد.