جداسازی cfDNA از محیط کشت جنینی و ارتباط آن با توانایی جنین در لانه‌گزینی و تعدیل سیستم ایمنی مادری
Abstract
هدف اصلی پزشکی تولیدمثل کمک به زوجین جهت دستیابی به نتاج سالم است. انتقال یک رویان یوپلویید باعث کاهش شیوع مشکل بارداری چندقلویی و سقط می‌شود و از طرف دیگر باعث افزایش دقت و کارایی در لقاح داخل آزمایشگاهی می‌شود. استفاده هم‌زمان تکنولوژی لقاح داخل آزمایشگاهی و تشخیص‌های ژنتیکی قبل از لانه‌گزینی جنین می‌تواند باعث افزایش تولد نوزاد سالم شود. تحقیقات ثابت کردند کهcfDNA در مایع بلاستوسل و محیط کشت جنین وجود دارد و برای انتخاب رویان سالم‌تر می‌تواند مورداستفاده قرار گیرد. برای جلوگیری از رد رویان توسط سیستم ایمنی مادری چندین مکانیسم مادری، جفتی و جنینی مشارکت دارند. از سلول‌های سیستم ایمنی، لنفوسیت‌های T و سلول‌های کشنده طبیعی نقش حیاتی در تعدیل محیط رحمی برای دستیابی به بارداری سالم را ایفا می‌کنند هدف از این تحقیق ارزیابی ارتباط میزان غلظت cfDNA در محیط کشت جنینی با میزان لانه‌گزینی رویان و تعدیل سیستم ایمنی مادری است.
روش: در این مطالعه 30 بیمار بر اساس معیارهای ورود و خروج انتخاب‌شده و رویان‌های موردنظرشان تا مرحله بلاستوسیست کشت داده شدند. برای هر بیمار یک بلاستوسیست بر اساس معیارهای گاردنر درجه‌بندی‌شده و به رحم مادر انتقال داده شد. میزان غلظت cfDNA در محیط کشت جنینی به‌وسیله نانودراپ اسپکتروفتومتری با طول‌موج 260 نانومتر مورد ارزیابی قرار گرفت. درصد Th1، Th2،Th17 ، Treg، NK cells ، NK cells cytotoxicityدرPBMC جداشده از 30 بیمار موردنظر در هفته دوم و دوازدهم بعد از انتقال رویان با استفاده از تکنیک فلوسایتومتری بررسی شدند.
نتایج: بر اساس نتایج، در گروه رویان‌های باکیفیت بالا غلظت cfDNA 9.201±24.62 و در گروه رویان‌های باکیفیت پایین 9.768±21.58 بود و ارتباط معنی‌داری بین غلظت cfDNA و کیفیت رویان‌ها وجود نداشت. غلظتcfDNA در گروه‌های مختلف β-HCG- ، β-HCG+ و ongoing pregnancy به ترتیب 20.70±9.224، 27.97±7.990، 28.91±8.566 بود و تفاوت معنی‌داری بین گروه‌ها ازنظر آماری وجود نداشت. نسبت Th1/Th2 و Th17/Treg به‌طور معنی‌داری در زنان باردار کاهش (<0.0001 p) یافت و همچنین میزان سلول‌های کشنده طبیعی و سطح سمیت شان به‌طور معنی‌داری (0.0005 و p=0.0048) در گروه ongoing pregnancy سقوط کرد و هیچ ارتباط معنی‌داری بین میزان غلظتcfDNA و میزان سلول‌های ایمونولوژیکی در سه گروه مشاهده نگردید.
نتیجه‌گیری: این تحقیق ما آشکار کرد که سطح غلظتcfDNA در محیط کشت جنینی نمی‌تواند ارتباطی با کیفیت رویان و میزان لانه‌گزینی رویان داشته باشد و معیاری جهت پیش‌گویی ادامه بارداری و تعدیل سیستم ایمنی مادری مورداستفاده قرار گیرد و مطالعات جامع دیگری جهت شناسایی دقیقcfDNA برای ارزیابی ژنتیکی رویان ضروری به نظر می‌رسد.