بررسی تاثیر عصاره کورکومین در متیلاسیون پروموتور ژن MMP-9 در سل لاین SW-480 سرطان کلورکتال

Abstract

سرطان کولون یا کارسینوماي کولون نوعی بیماري است که مشخصه آن رشد کنترل نشده سلول در بافتهاي کولون است. اگر این بیماري درمان نشود، رشد سلولی میتواند در یک فرایند به نام متاستاز به بیرون از کولون گسترش پیدا کند و به بافتهاي اطراف یا سایر اعضاي بدن برسد.کورکومین یک ماده پلی فنلی موجود در ریزوم زردچوبه از دسته کورکومینوییدها می باشد که به علت دارا بودن خاصیت آنتی اکسیدانی، آنتی باکتریایی، ضد التهابی و بازدارندگی بدخیمی در درمان بیماري هاي مختلفی استفاده می شود. بنابراین هدف از این مطالعه بررسی اثر مهاري کورکومین بر متیلاسیون ژن MMP-9و مهاجرت سلول هاي رده SW-480 سرطان کولون میباشد. روش کار: سلولهاي سرطانی کولون (SW-480) کشت داده شده و تحت تیمار با غلظت هاي مختلف کورکومین قرار گرفت. جهت بررسی اثرات ضد تکثیري کورکومین بر روي سلولهاي سرطانی کولون، از آزمون ریزکشت تترازولیوم( MTT) استفاده شد. همچنین مهاجرت سلول هاي سرطانی کولون تیمار شده توسط کورکومین با استفاده از روش اسکراچ مورد بررسی قرار گرفت. پس از استخراج DNA کل از سلولهاي سرطانی تیمار شده و کنترل ،میزان متیلاسیون پروموتر ژن RECK با استفاده از روش MET-HRM مورد بررسی قرار گرفت. در نهایت بیان نسبی ژنهاي مختلف درگیر در ایجاد و پیشرفت سرطان با استفاده از روش Real-Time PCRمورد ارزیابی قرار گرفت. دادههاي حاصل از Real-Time PCR در گروههاي کنترل و تیمار مقایسه شده و تفاوت بیان ژنهاي مورد مطالعه مشخص گردید. نتایج: یافته هاي حاصل از تست MTT نشان داد که اثر سیتوتوکسیک کورکومین به صورت وابسته به دوز و زمان میباشد. بر اساس نتایج این مطالعه کورکومین از طریق سرکوب ژن9 -MMP موجب مهار مهاجرت سلول هاي سرطانی کولون می شود .همچنین مشاهده گردید که کورکومین موجب افزایش متیلاسیون پروموتر ژن MMP-9در سلول هاي سرطانی می شود. بر اساس نتایج بررسی بیان ژن هاي درگیر در سرطان ،کورکومین از طریق مکانیسم هاي مختلف مولکولی همچون القاء آپوپتوز موجب مهار رشد و تکثیر سلول هاي سرطانی کولون می شود.