بررسی فراوانی جهش های gyr Aمنجر به مقاومت هلیکوباکترپیلوری به سیپروفلوکساسین در نمونه های FFPE بیماران مبتلا به آدنوکارسینومای معده

Abstract

هلیکوباکتر پیلوری در بروز بسیاری از اختلالات معدی-مری شایع از جمله آدنوکارسینوما و لنفومای معده دخیل می باشد. از این رو درمان عفونت هلیکوباکترپیلوری اهمیت فراوان دارد.. هلیکوباکتر پیلوری شانس ابتلا به سرطان معده را به میزان شش برابر افزایش می دهد. مقاومت عليه اين دسته از آنتي بيوتيك ها از طريق جهش هاي نقطه اي در ناحيه تعيين كننده مقاومت كينولون ژن gyrA در محل اسيد آمينه هاي 87 و91 اتفاق مي افتد. هدف: این مطالعه برآنیم تا فراوانی جهش های gyr A را که منجر به مقاومت هلیکوباکترپیلوری به سیپروفلوکساسین می شود در نمونه های FFPE بیماران مبتلا به آدنوکارسینومای معده بررسی کنیم. روش کار: در اين مطالعه با استفاده از روش واكنش زنجيرهاي پليمراز (PCR) اوره آز وجود هليكوباكتر پيلوري تایید شد. در مرحله بعد با استفاده از روشReal -time PCR ، مقاومت به آنتی بیوتیک سیپروفلوکساسین در اثر جهش هاي نقطه اي مرتبط با آن در ژن gyrA با استفاده از پروب هاي اختصاصي و بررسی دمای ذوب مورد ارزيابي قرار گرفت .در نهایت با استفاده از روش های توالی یابی نتایج حاصل از Real time-PCR مورد تایید قرار گرفتند. نتایج : Real -time PCR و بررسی نقطه ذوب نشان داد که 8 ( 25.8%) مورد از بیماران سرطانی به این آنتی بیوتیک مقاوم هستند که از این میان 5 مورد تنها در جایگاه 87 و 2 مورد تنها در جایگاه 91 و یک مورد در هر دو جایگاه جهش داشتند. همچنین بررسی منحنی ذوب بدست آمده از افراد کنترل نشان داد که از 23 DNA بدست آمده، 5 مورد DNA مقاوم به سیپروفلوکساسین بودند که همگی در جایگاه 81 تغییر Tm نسبت به DNA حساس داشتند. نتیجه گیری: میزان مقاومت به این آنتی بیوتیک در بیماران مبتلا به سرطان معده بیشتر از افراد کنترل بود اما این تفاوت از نظر آماری معنی دار نمی باشد.