مطالعه اثر هیپوکسی بر عملکرد های تکثیری و مهاجرتی اگزوزوم های مشتق ازرده سلولی متاستاتیک سرطان پروستات بر سلول های HUVEC

Abstract

هیپوکسی یک سطح غیر فیزیولوژیکی از اکسیژن است و در اکثر تومور ها یک پدیده رایج به شمار می رود و از راه هایی مثل رگزایی منجر به گسترش تومور میشود.سلول های سرطانی پروستات برای گسترش توموراز طریق رگزایی مکانیسم های مختلفی دارند یکی از این مکانیسم ها ترشح اگزوزوم های حاوی فاکتور های انکوژن وmiRNAهای موثر در بیان این فاکتور هاست.اگزوزوم هااز مکانیسم های ارتباط بین سلولی هستنددر شرایط هیپوکسی ترشح اگزوزوم ها افزایش یافته و محتوی آنها هم متفاوت خواهد بود.هدف از این مطالعه تعیین اثراگزوزوم های مشتق از رده سلولی سرطان پروستات PC3، DU145 بر سلول های اندوتلیالی HUVEC از نظر تکثیر و مهاجرت و بیان ژن های مرتبط با مهاجرت و تکثیر مثل ملکول های VEGF و HIF-1αو بیان miRNA های 16و 433 دارند. مواد و روش ها: رده سلولی pc3،DU145 در محیط کشت کامل تحت شرایط هیپوکسی و بدون هیپوکسی کشت داده شدند واز مایع رویی آنها توسط اولترا سانتریفیوژ اگزوزوم استخراج شد.استخراج اگزوزوم توسط میکروسکوپ الکترونی تایید شد. سلول های HUVEC بعنوان مدل سلولی اندوتلیوم کشت داده شدند و اثر اگزوزو های استخراجی بر تکثیر آنها توسط تست MTT و اثر این اگزوزوم ها بر بیان ژنهای VEGFA، HIF-1α و miR-16 miR-433 توسط آزمونqRT-PCR و تاثیر اگزوزوم ها بر مهاجرت این سلول ها توسط تست خراش مورد بررسی قرار گرفت . یافته ها: نتایج این مطالعه در رده سلولیHUVEC نشان داد که تیمار این سلول ها با اگزوزوم های مترشحه از رده ی سلولی سرطان پروستات PC3، DU145 تحت شرایط هیپوکسی باعث افزایش تکثیر و مهاجرت سلول هایHUVEC و افزایش بیان ژن هایVEGF ،HIF-1α می شود و همچنین بیان mir-16 و mir-433 در سلول های HUVEC تحت تاثیر اگزوزوم مترشحه از DU145,PC3 در شرایط هیپوکسی کاهش نشان میدهد.