بررسی تاثیر هم کشتی کاندیشن مدیوم سلولهای فیبروبلاست بر امکان تبدیل ویژگی های مورفولوژی و مولکولی زیر گروه های لومینال A و B سرطان پستان
چکیده
هتروژن بودن سلول های سرطان پستان یکی از عوامل مشکل ساز در پروسه تشخیص و درمان این بیماری به شمار می آید. از طرفی تاثیر فاکتور های استرومایی موجود در بافت تومور باعث ایجاد تغییراتی در روند پیشرفت تومور می شود که در نهایت روند درمان را به چالش می کشد. فیبروبلاست ها به عنوان فراوانترین جزء ریزمحیط توموری دارای نقش فراوانی در تعاملات بین سلول های سرطانی و ریزمحیط است. فیبروبلاست های مرتبط با سرطان در رگ زایی و تولید فاکتور های رشد که باعث ایجاد واکنش های سرکوب کننده ایمنی می شوند. تبدیل انواع سرطان پستان و پیش آگهی و ویژگی مختلف مولکولی و مورفولوژی به یکدیگر بر اثر فعالیت های فیبروبلاست های فعال موجود در ریزمحیط دارای اهمیت است.
مواد و روش: در این مطالعه به بررسی دو زیرگروه Luminal A وLuminal B از سرطان پستان پرداخته شد. برای این منظور از گونه سلولی MCF-7 و MDA-MB-361 که بر ترتیب نوع AوB می باشند از انیستیو پاستور تهیه گردید. کاندیشن مدیوم فیبروبلاستی و اسفروئیدی تهیه شد. سلول های مورد مطالعه در هم کشتی با کاندیشن مدیوم FBS10% و کاندیشن مدیوم فیبروبلاستی و اسفروئیدی قرار گرفت وبرای بررسی مورفولوژی سلول ها و امکان تبدیل آنها به یکدیگر میزان Shape factor دو رده محاسبه گردید. Ki67 در مطالعه ما برای اندازه گیری میزان تکثیر سلولی توسط روش ایمونوسیستوشیمی با ایمونوفلوروسنت محاسبه گردید. برای بررسی ژنی دو ژن مربوط به گیرنده های استروژنی و ژن های تکثیری به روش real time pcr اندازه گیری شد.
یافته ها: فیبروبلاست ها به روش LOT فعال شد و با استفاده از روش وسترن بلات با اندازه گیری a-SMA فعال شدن اسفروئید ها اثبات گردید. با اندازه گیری میزان بیان ژن های تکثیری در حضور فیبروبلاست بصورت کاندیشن مدیوم اسفروئیدی و فیبروبلاستی در نوع لومینال A کاهش بیان نشان داد.همچنین در گروه لومینال B کاهش بیان این ژن ها در سلول های تیمار شده با کاندیشن مدیوم فیبروبلاستی قابل رویت است و بر عکس در گروه تیمار شده با کاندیشن مدیوم اسفروئیدی افزایش بیان دیده می شود. در بررسی ژن های وابسته به استروژن تحلیل کمی پیچیده است در نوع A، ژن FOXA1 در سلول های تیمار شده با فیبروبلاست و اسفروئید کاهش بیان دارند و برعکس ژن BCL2 در هر دو نوع تیمار شده افزایش بیان دارند.این در حالی است که در گروه لومینال B تیمار شده با اسفروئید افزایش بیان ژن دیده می شود.