تأثیر فاکتور رشدی تغلیظ شده (Concentrated Growth Factor) بر پتانسیل Regenerative سلول‌های بنیادی پالپ دندان در شرایط التهابی

Abstract

زمینه و هدف تاثیر فاکتور رشدی تغلیظ شده CGF(Concentrated Growth Factor) بر رژنراسیون سلول های بنیادی پالپ دندان در شرایط کوتاه مدت التهابی به اثبات رسیده است. تاکنون تاثیر بلند مدت شرایط التهابی بر پتانسیل رژنراسیون سلول های بنیاد پالپ دندان درمان شده با فاکتور رشدی تغلیظ شده ارزیابی نشده است. لذا این مطالعه با هدف بررسی اثر فاکتور رشدی تغلیظ شده بر پتانسیل رژنراسیون سلول های بنیادی پالپ دندان در شرایط التهابی انجام شده است.

مواد و روش‌ها سلول های بنیادی پالپ دندان در محیط حاوی CGF،LPS (Lipopolysaccharide) در غلظت های 0.1 ، 1 و 10 میکروگرم در میلی لیتر و ترکیب CGF و LPS به مدت 21 روز کشت داده شدند.به منظور بررسی زیست پذیر، تکثیر ومهاجرت سلول ها تست MTT و Scratch assay انجام گردید. همچنین میزان فعالیت آلکالین فسفاتاز و میزان کلاژن تولید شده جهت ارزیابی توانایی القای استئو/ادنتوژنیک توسط CGF و/یا LPS اندازه گیری شد. میزان بیان ژن های استئو/ادنتوژنیک شامل DMP-1 (dentin matrix protein 1)، DSPP (dentin sialophosphoprotein)، OPN (osteopontin)، Runx2 (Runt-related transcription factor 2) و OCN (osteocalcin) به روش q RT-PCR ارزیابی گردید. داده های به دست آمده پس از بررسی توزیع نرمال ، توسط آزمون ANOVA( one-way analysis of variance) و آزمون تعقیبی Tukey آنالیز گردید . سطح معناداری P value کمتر از 0.05 در نظر گرفته شد و آنالیز آماری با کمک نرم افزار GraphPad Prism ورژن 9.2.0 انجام شد.

يافته‌ها قرار گیری سلول های بنیادی پالپ دندان در معرض CGF در شرایط التهابی طولانی مدت ، اثر مرگ سلولی ناشی از LPS را کاهش می دهد. به علاوه CGF و LPS(1 µg / ml) جداگانه یا در ترکیب با یکدیگر موجب افزایش معنادار قابلیت مهاجرت سلول های بنیادی پالپ دندان شده و بطور معناداری منجر به القای استئو/ادنتوژنیک از طریق افزایش فعالیت آلکالین فسفاتاز و میزان تولید کلاژن می شوند. از طرفی درمان با CGF موجب افزایش معناداری در میزان بیان ژن های Runx2 ، DSPP، OCN و OPN می شود در حالی که LPS 1 صرفا منجر به افزایش در ژن OCN می شود. نتيجه‌گيري طبق نتایج این مطالعه ، CGF به تنهایی یا در ترکیب با LPS می تواند ماده ی درمانی مناسبی جهت رژنراسیون و التیام کمپلکس پالپ-عاج در شرایط بلند مدت التهاب مزمن شود.