بررسی نقش تیموکینون در میزان القاء آپوپتوز توسط سیس پلاتین از طریق آسیب اکسیداتیو DNA در سلول‌های سرطانی Saos-2
Abstract
استئوسارکوما یک بیماری نادر با پیش آگهی ضعیف است. تحقیقات بنیادی درک بهتری از پاتوژنز استئوسارکوما و کشف روش‌های درمانی بالقوه جدید را امکان پذیر کرده است. یافتن رویکردهای درمانی و پیشگیرانه که بتواند سلول‌های توموری را بدون تأثیر بر سلول‌های طبیعی و غلبه بر مقاومت دارویی هدف قرار دهد، به طور معجزه آسایی مفید خواهد بود. در اینجا، ما شواهد جدیدی ارائه می‌دهیم که درمان ترکیبی تیموکینون با سیس پلاتین از طریق القای آسیب اکسیداتیو DNA در سلول‌های Saos-2 منجر به تشدید اثرات آپوپتوزی سیس پلاتین می‌شود.
مواد و روش‌ها:
سلول‌ها در محیط کشت 1640RPMI- حاوی 10% FBS کشت داده خواهند شد. سپس به تنهایی/ با ترکیب تیموکینون و سیس پلاتین تیمار شده و اثر سیتوتوکسیک آنها بر روی سلول‌ها طی 72 ساعت بررسی و همچنین غلظت ایده‌آل آنها به تنهایی و در ترکیب با یکدیگر با استفاده از آزمایش MTT تعیین می‌گردد. در ادامه به منظور بررسی میزان بیان پروتئینH2AX - γ آزمایش وسترن بلات انجام خواهد شد. سپس میزان OXO-dG-8، به عنوان مارکر آسیب DNA به روش الایزا در گروه‌های تریت شده با تیموکینون، سیس پلاتین و ترکیب هر دو اندازه‌گیری می‌شود. برای بررسی آپوپتوز سلولی فلوسیتومتری انجام خواهد گرفت.
نتایج:
تیموکینون به طور قابل توجهی اثرات سمیت سلولی سیس پلاتین را افزایش می‌دهد. علاوه بر این، درمان ترکیبی تیموکینون با سیس پلاتین به طور قابل توجهی باعث افزایش سطح بیان γ-H2AX در رده سلولیSaos-2 شد. همچنین، این درمان ترکیبی منجر به افزایش چشمگیر سطح ROS، و سطح بیان-OXO-dG 8 می‌گردد. بعلاوه، تیموکینون منجر به تشدید آپوپتوز ناشی از سیس پلاتین در سلول‌های Saos-2 در مقایسه با سلول‌های تحت درمان به تنهایی تیموکینون یا سیس پلاتین شد.