بررسی تاثیر اگزوزوم های مایع رحمی غنی شده با گنادوتروپین جفتی انسان )hCG )برروی بیان ژن های مرتبط با پذیرندگی اندومتر به صورت برون تنی

Abstract

قدمه: اگزوزومهای مترشحه از اندومتر عوامل فعال زیستی را به سلولهای اپیتلیال رحمی و سلولهای تروفواکتودرم جنینی منتقل کرده و از این طریق النه گزینی را تنظیم میکنند. از 1 طرفی مطالعات قبلی نشان دادهاند که تجویز داخل رحمی گنادوتروپین جفتی انسانی )hCG( می تواند باعث بهبود پذ یرندگی اندومتر 2 شود. بنابراین، در این مطالعه دارورسانی hCG به سلول های اندومتر توسط اگزوزوم های رحمی برا ی افزایش پذ یرنگی اندومتر بررس ی میشود. روشها: اگزوزومهای رحمی با استفاده از اولترا سانتریفی وژ سریالی از مایع رحمی جدا شده و با پراکنش نوری دینامیک، میکروسکوپ الکترونی و وسترن بالتینگ مشخص هیابی شد ند . از چرخه فریز-ذوب و سونیکاسیون برا ی بارگذاری hCG در اگزوزومها استفاده شد. الگوی آزادسازی دارو و جذب اگزوزومها به سلولها ی اندومتر مورد مطالعه قرار گرفت. برای ارزیابی پتانسیل پذیرندگی سلولهای اندومتر تیمار شده با hCG لود شده در اگزوزوم از روش النه گزینی برون تنی در محیط آزمایشگاهی استفاده شد ، که درآن اسفروئید های JAR به عنوان جنین شبیه سازی شده مورد استفاده قرار گرفتند و میزان اتصال آنها به سلول های اندومتر به عنوان معیاری از پذیرندگی اندومتر بررسی شد. در نهایت، تأثیر hCG لود شده در اگزوزوم بر بیان چند ین ژن مرتبط با پذ یرندگی اندومتر با روش PCR time Real ارزیابی گردید. یافته ها: اگزوزومهای مایع رحمی با مورفولوژی فنجانی شکل یا کرو ی با اندازه متوسط 8/91 نانومتر و پتانسیل زتا 75/9 -میلی ولت جداسازی شد . ظرفیت لودینگ اگزوزومها برای hCG با استفاده از روش سونیکاسیون و چرخه فریز- ذوب به ترت یب 74/73 ± 05 /710 و 66/95 ± 1 Human chorionic gonadotropin 2 Endometrial receptivity2 چکیده  06/245 بدست آمد . اثر hCG لود شده در اگزوزوم بر پذ ی رندگی اندومتر و میزان اتصال اسفروئید های JAR بیشتر از hCG یا اگزوزوم به تنهایی بود. نتایج همچنین نشان داد که hCG باعث افزایش بیان ژنهای LIF و Trophinin و کاهش بیان ژنهای 16-Muc وIGFBP1 میشود و مشخص شد که وقتی hCG در اگزوزوم های رحمی لود شود، تأث یر آن در بیان LIF و 16-Muc به طور قابل توجهی تشد ید میشود. نتیجه گیری: این یافته ها ام ید ما را در استفاده از اگزوزوم های حاصل از مایع رحمی به عنوان حامل موثر پروتئین ها یا سای ر عوامل درمانی موثر در پذیرندگی اندومتر برای انتقال به سلولهای اندومتر تقویت می کند.