MOLT- میزان آپوپتوز در رده ي سلولی 4 miR -1- و 124miR-34b، miR-34a بر روي میزان بیان Azacytidine - بررسی تاثیر 5

Abstract

متیلاسیون DNA یک فرایند بیوشیمیایی تعیین کننده برگشت پذیر بیان ژن است که اغلب در لوسمی لنفوبلاستیک حاد ALL مشاهده می شود. اعتقاد بر این است که افزایش نابجای فعالیت DNA متیل ترانسفراز باعث ایجاد سطوح غیرطبیعی متلاسیون DNA در سلول های توموری می شود. مهارکننده DNA متیل ترانسفراز، آزاسیتیدین ( 5-AZA ) یک داروی اپی ژنتیکی است که از نظر بالینی مورد استفاده قرار می گیرد و باعث افزایش د متیلاسیون پروموتر و بیان مجدد ژن در سرطان های انسانی می شود. در این مطالعه ، ما سلولی سیمیت 5- آزاسیتیدین ( 5-AZA) بر سلول های لوسمی MOLT4 , Jurkat در شرایط آزمایشگاهی بررسی کردیم و مکانسیم های مولکولی اساسی مرگ و میر سلول را مورد بررسی قرار دادیم . مواد و روش ها : سلول های MOLT4 , Jurkat با 5-AZA به مدت 12 ، 24 و 48 ساعت تحت تیمار قرار گرفتند.تاثیر درمان 5-AZA بر زنده ماندن سلول ( سنجش MTT ) رنگ آمیزی V/PI آنکسین ( سنجش آپوپتوز) بیان ژن ها و miRNA ( Real Time PCR ) اندازه گیری شد. یافته ها : نتایج نشان داد که 5-AZA می تواند میزان آپوپتوز سلول های MOLT4 , Jurkat را در شرایط آزمایشگاهی به روش وابسته به زمان و احتمالا از طریق مکانیسم های آپوپتوز القا کند. ما دریافتیم که درمان با 5-AZA می تواند بیان miRNA های خاموش شده miR-34b ، miR-34a و miR-124-1 را در سلول های تحت درمان افزایش دهد . علاوه بر این ، تجزیه و تحلیل mRNA نشان داد که سلول های MOLT4 , Jurkat ، بیان ژن p53 را 10 برابر بیشتر از سلول ها ی درمان نشده دارند.، در حالیکه این سلول ها بیان زیرمجموعه ای از ژن های مرتبط با عملکرد از جمله MYC ، BCL2 ، APEX ، SIRT1 ، SNAIL1 و Vimentin را تا حدی پس از درمان با 5-AZA سرکوب می کنند .