بررسی میزان hsa-let-7d-5p ، hsa-let-7g-5p وhsa-miR-15b-5p در پلاسمای بیماران مبتلا به آلزایمر در مقایسه با افراد نرمال
Abstract
بیماری آلزایمر(Alzheimer)یک بیماری نورودژنراتیو پیشرونده است که با از دست دادن حافظه، اختلال شناخت و شخصیت و عملکرد اجتماعی بدون اختلال هوشیاری شناخته می-شود. بارزترین ویژگی آن اختلال حافظه است که بتدریج ایجاد شده و پیشرفت میکند. در ابتدا اختلال حافظه به وقایع و آموختههای اخیر محدود میشود ولی بتدریج خاطرات قدیمی هم آسیب میبینند. در حال حاضر هیچ دارو یا عاملی که بتواند به صورت قطعی آلزایمر را به تاخیر بیندازد یا از پیشرفت آن در افراد مسن جلوگیری کند، وجود ندارد.
با توجه به روند ایجاد و پیشرفت بیماری، یکی از مشکلات اصلی در زمینه تشخیص اولیه این بیماری، عدم وجود بیومارکرهاي تشخیصی قطعی برای این بیماری است. در سالهای اخیر تلاش برای یافتن بیومارکرهایی که بتوانندبیماری را در مراحل اولیه شناسایی کنند منجر به توجه پژوهشگران به دسته ای از مولکولهای زیستی به نام micro RNA ها شد که شاید بتوانند به عنوان بیومارکرهاي نویدبخش تشخیصی عمل کنند. بررسی های اخیر منجر شده تا miRNA هایی مانند has-let7d5p،hsalet7g5p و miRNA15b5pبه عنوان بیومارکرهای خونی در تشخیص این بیماری مورد توجه قرار گیرند.
بنابراین در پروژه ي حاضر، هدف ما بررسی میزان بیان این ژنها در پلاسمای بیماران مبتلا به آلزایمر و مقایسه آن با افراد نرمال می باشد.
روش کار و مواد: طی پروسه ی تشخیص بیماران مبتلا به آلزایمر، مجموعه ای از 50 نمونه خون از افراد مبتلا و 50 نمونه از افراد سالم متناسب با گروه بیمار جمع آوری شد. سپس RNA تام از هر نمونه استخراج شدو با بهره گیری از کیت سنتز cDNA نمونه ها به cDNA تبدیل شده و در نهایت سطح بیان ژنهای هدف با استفاده از روش Real-time PCR اندازه گیری و با استفاده از آزمونهای آماری مناسب ارزیابی و مقدار P value کم تر از 05/0 معنی دار تلقی شد.
یافته ها:
سطح بیان نسبی دو ژن از سه ژن مورد بررسی در نمونه های بیمار نسبت به نمونه های سالم به میزان معناداری افزایش نشان داد (013/0 P value let 7g5p=) و(007/0P value= 7d5p،) این در حالی است که تغییزات ژن سوم در بین دو گروه از لحاظ آماری بی معنی بود (7624/0p value miR-15b=).