استفاده ازآنتی سنس پپتید نوکلئیک اسید برای مهار ژنهای ویرولانس efaA و ftsZانتروکوکوس فکالیس و ارزیابی تأثیر آن درتشکیل بیوفیلم وبیان این ژنها
Abstract
انتروکوکوس فکالیس یکی از پاتوژن‌های مهم در عفونت‌های بیمارستانی است امروزه پیدایش باکتری‌های مقاوم به آنتی بیوتیک و پیشرفت آهسته در تشخیص داروهایی ضدمیکروبی جدید کارآیی را محدود کرده است و باعث می‌شود تا استراتژیهای جدیدی بر علیه باکتریها به کار گرفته شود. بنابراین در این مطالعه هدف ما برآورد و تعیین نقش ژن efaA در تشکیل بیوفیلم و نقش ژن ftsZ برای کنترل رشد باکتریها با استفاده از خاصیت آنتی سنسی پپتید نوکلئیک اسید بود.
مواد و روش ها
دراین مطالعه از انتروکوکو س‌فکالیس 29212 ATCC استفاده شد و PNA ها برعلیه نواحی استارت کودون ژن های efaAو ftsZ طراحی شده بودند و این PNA ها به RNAمکمل متصل و آن را بلوکه میکنند. برای انتقال داخل سلولی PNA ضدژن ftsZ از تکنیک الکتروپوریشن و بمنظور برآورد تغییرات رشد باکتری از روش spot-plating استفاده شد. برای بررسی اثرات مهاری anti-efaA PNAs برروی تشکیل بیوفیلم از روش بیوفیلم اسی و برای بررسی بیان ژن از روش Realtime PCR استفاده شد.
یافته‌ها
بعد از مواجه PNA علیه ژن ftsZ هیچ رشدی از باکتری انتروکوکوس فکالیس درمحیط آگار مشاهده نشد و PNA علیه ژن efaAکه درتشکیل بیوفیلم نقش داشت بیان ژن را 95 % کاهش داد و تولید بیوفیلم را پایین آورد، بعلاوه در MTT assayهیچ گونه سمیتی برای ( anti-ftsZ, anti-efaA)PNAsروی سلول‌های MCF7 مشاهده نشد.