مطالعه کنتیکی و ترموديناميکي برهمکنش قطعات scFv آنتي بادي با c-Met با استفاده از روش تشديد پلاسمون سطحي (SPR) مبتني بر فاژ
چکیده
هدف ما از انجام این مطالعه بررسی ویژگی های کنتیکی و ترمودینامیکی برهمکنش بین c-Met و scFv های بدست آمده بر علیه آن شامل ES2, ES1 و ES3 توسط روش تشدید پلاسمون سطحی (SPR) می باشد.
مواد و روش¬ها: برای تثبیت فاژهای حاوی scFv، از چیپ طلای اصلاح شده با 11- مرکاپتودکانوئیک اسید (11-MUA) استفاده شد. پس از فعال سازی گروه های کربوکسیلیک، فاژها از طریق اتصال آمینی به سطح چیپ متصل شدند و برهمکنش بین c-Met با هریک از scFv ها در غلظت های مختلف (بین 20 تا 665 میکرومولار) مورد بررسی قرار گرفت.
یافته‌ها: نتایج حاصل از مطالعات کنتیکی در دمای°C 25 نشان داد که ES1 دارای بیشترین افینیتی (10-8 × 36/3(KD = در برهمکنش با c-Met است. همچنین تغییرات مثبت پارامترهای ترمودینامیکي شامل آنتالپی و آنتروپی حاکی از آن بود که بر همکنش بین ES1 و c-Met از نوع پیوند هیدروفوبیک می باشد. علاوه بر آن، مقدار مثبت انرژی آزاد گیبس نشان داد که این برهمکنش غیر خود به خودی و بر اساس آنتالپی است.