بررسی میزان بیان ژن BMP2 در سلول های ژله وارتون بعد از انتقال میکرو RNA 424 در محیط آزمایشگاه
چکیده
مقدمه و هدف: بازسازي استخوان هاي فكين در بيماري هاي مادرزادي شكاف كام و لب، جراحات و صدمات استخواني ناشي از تروما و تصادفات، نقائص ايجاد شده به علت وجود ضايعات بدخيم و يا خوش خيم استخواني كه گاها منجر به برداشت قسمت اعظمي از فكين مي شود همواره بحث برانگیز می باشد. در سال های اخیر مبحث تنظیم تشکیل استخوان بوسیله miRNA ها بیشتر مورد توجه قرار گرفته است .miRNA 424 یکی ازاین موارد است که در پرولیفراسیون و تمایز استئوژنیک نقش مهمی دارد. هدف از انجام این مطالعه بررسی تاثیر miRNA 424 در محیط ازمایشگاهی بر میزان استخوان سازی سلول های بنیادی ژله وارتون از طریق ارزیابی میزان بیان ژن BMP2 می باشد.
روش کار: وکتور حاوی ژن های MIR424 و BMP2 و مارکر GFP در پایه لنتی ویروس طراحی و سنتز شد. پس از تأیید وکتور، برای Packaging از سلول های HECKT293 استفاده شد. محیط روی سلول ها در زمان های 24، 48 و 72 ساعت جمع آوری شده و بر روی سلول های ژله وارتون ریخته شد. میزان بیان ژن BMP2 از طریق Real time PCR در روز 14 بررسی شد. آنالیز آماری با نرم افزار SPSS17و سطح معنی داری P<0.05 انجام شد.
یافته ها: بر اساس نتایج این مطالعه میزان بیان ژن BMP2 در حضور میکرو RNA424 ( گروه مورد) در مقایسه با عدم حضور آن (گروه شاهد) به میزان 0434/8 برابر افزایش یافته بود. این اختلاف از نظر آماری با 05/0>P معنی دار گزارش شد.
بحث: بر اساس نتایج این مطالعه آزمایشگاهی میزان بیان ژن BMP2 در مجاورت MIR424 به مرتب افزایش می یابد. در نتیجه می توان از این وکتور برای بازسازی استخوان در مدل های حیوانی استفاده کرد نتایج این مطالعات زمینه را برای کاربرد ژن درمانی در بازسازی استخوان فراهم کند.