بررسی اثرات ضد سرطانی آمیگدالین خالص و عصاره هسته زردآلوی تلخ و شیرین (Prunus armeniaca L.) بر سلول های سرطانی پانکراس
Abstract
مقدمه و هدف: سرطان پانکراس چهارمین علت مرگ و میر ناشی از سرطان است. جراحی و شیمی درمانی، رایج ترین روش های درمانی برای سرطان پانکراس می باشند، ولی میزان پاسخ درمانی در مراحل پیشرفته بیماری، کمتر از 20 درصد است. در سال های اخیر، توجه زیادی به ترکیبات طبیعی شده است. هسته زردآلو (Prunus armeniaca L.) دارای خواص دارویی متعددی از جمله فعالیت ضد سرطانی می باشد و آمیگدالین موجود در هسته زردآلو می تواند باعث القای آپوپتوز شود. در این مطالعه اثرات سميت سلولی و آپوپتوزی آمیگدالین و عصاره اتانولی هسته زردآلوی تلخ و شیرین بر سلول های سرطانی PANC-1 پانکراس و سلول های نرمال اپیتلیالی 293/KDR بررسی شد.
روش کار و مواد: عصاره ها به روش ماسراسیون تهیه شدند. برای ارزيابي سميت سلولی، روش MTT مورد استفاده قرار گرفت. آپوپتوز سلول های تیمار شده PANC-1 و 293/KDR با استفاده از روش های رنگ آمیزی DAPI و فلوسایتومتری بررسی شد و بیان ژن های پیش برنده آپوپتوز (Bax و کاسپاز-3) و آنتی آپوپتوز (Bcl-2) به روش Real-time PCR ارزیابی شد.
یافته ها: هر دو عصاره اتانولی هسته زردآلوی تلخ و شیرین و آمیگدالین باعث مهار رشد سلول های سرطانی پانکراس در رابطه وابسته به غلظت و زمان شدند. غلظت مهاری (IC-50) عصاره اتانولی هسته زردآلوی تلخ و شیرین به ترتیب برابر 704 و 945 میکروگرم بر میلی لیتر و آمیگدالین 35 میلی گرم بر میلی لیتر در طول زمان 72 ساعت مشخص شد. با توجه به نتایج MTT، عصاره اتانولی هسته زردآلوی تلخ، اثر سميت سلولی بیشتری در مقایسه با عصاره اتانولی هسته زردآلوی شیرین و آمیگدالین در سرکوب رشد سلول های سرطانی PANC-1 داشت. رنگ آمیزی DAPI و فلوسایتومتری به ترتیب نشان دهنده هسته های متراکم و تکه تکه شده و افزایش تعداد سلول های آپوپتوزی در مراحل اولیه و تاخیری بودند. همچنین افزایش بیان ژن هایBax و کاسپاز-3 و کاهش بیان ژن Bcl-2، تایید کننده آپوپتوز در سلول های PANC-1 بود. بر اساس نتایج، تیمارهای آمیگدالین و عصاره اتانولی هسته زردآلوی تلخ و شیرین می توانند از طریق مسیر میتوکندریایی باعث القای آپوپتوز در سلول های سرطانی PANC-1 پانکراس شوند.
نتیجه گیری: طبق نتایج مطالعه، آمیگدالین و عصاره اتانولی هسته زردآلوی تلخ و شیرین به عنوان عامل پیش برنده آپوپتوز در سلول های سرطانی پانکراس انسانی عمل می کنند در حالی که اثر معنی داری بر سلول های سالم 293/KDR ندارند و عصاره اتانولی هسته زردآلوی تلخ بیشترین تاثیر بر مهار رشد و القای آپوپتوز در سلول های سرطانی پانکراس را دارد. بنابراین شناسایی سایر مواد موثره هسته زردآلوی تلخ با اثر ضد سرطانی ضروری می باشد. علاوه بر این، برای تأیید اثر بالینی عصاره اتانولی هسته زردآلوی تلخ و شیرین به عنوان داروی ضد سرطان، نیاز به مطالعات in vivo است