بررسی میزان بیان ژن های hsa-miR-15a وhsa-miR-124 در طی تمایز سلول های بنیادی مزانشیمی انسانی به سلول های تولید کننده انسولین
چکیده
میکروRNAها, RNA¬های کوچک غیر¬کننده به طول 18-20 نوکلئوتیدی هستند که از طریق اتصال به مکان اختصاصی بروی mRNA ژن هدف بیان آن را کنترل می¬کنند. ازاین طریق میکروRNAها در بسیاری از فعالیت¬های زیستی از جمله چرخه سلولی, مرگ برنامه¬ریزی شده سلولی و همچنین تمایز دخالت دارند.روش¬ها : تمایز سلول¬های بنیادی مزانشیمی آدیپوسایتی (AD-MSCs) به سلول¬های تولید کننده انسولین (IPCs) با استفاده از محیط کشت تمایزی به مدت 28 روز انجام گرفت. بلوغ سلول¬های IPCs و عملکردی بودن آنها به ترتیب با روش رنگ آمیزی DTZ و اندازه¬گیری میزان هورمون¬های اختصاصی سلول¬های بتا مانند پپتید C و انسولین با روش الکتروکمی¬لومینسنس در روز 28 بررسی شد. در نهایت میزان بیان دو میکروRNA مد نظر یعنی miR-15a و miR-124 با روش Real Time-PCR در روز¬های 27،21،14،7،0بعد از تمایز اندازی¬گیری شد.یا فته ها: نتایج به دست آمده از این مطالعه حاکی از افزایش میزان بیان هورمون های انسولین و پپتید C بود که نشانگر عملکردی بودن سلول¬های IPCs وهمچنین مثبت بودن رنگ آمیزی DTZ گویای بلوغ کامل سلول¬های IPCs بود. همچنین میزان بیان دو miRNA نسبت به گروه کنترل (روز صفر) در روز 28ام بعد از تمایز حدود 5/1 برابر برای miR-15a و 2 برابر برای miR-124 بود.