مطالعه ژن های GTPaseهای کوچک غیر RAS (Rab25, Rab31) و microRNA های کنترل کننده این ژن ها (Let-7d, miR-185, miR-196a, miR-140) در بیماران سرطان پستان

Abstract

: سرطان پستان یکی از شایعترین علل مرگ و میر در جهان است و تشخیص سریع آن می‌تواند یک سیاست ضروری در بهبود پیش‌آگهی و بقای بیماران باشد. مطالعه حاضر با هدف شفاف سازی رابطه بین پیامدهای بالینی و سطح بیان ژن های Rab25 و Rab31 و میکروRNAهای کنترل کننده این Rabها (Let-7d, miR-185, miR-196a, miR-140) در بیماران سرطان پستان طراحی شده است. مواد و روش ها: در مطالعه حاضر، میزان بیان ژن های Rab25، Rab31،Snail ،Let-7d ، miR-185، miR-140 و miR-196a در سطح mRNA با استفاده از روش Real-time PCR و میزان بیان پروتئین ژن های Rab25، Rab31 و Snail با استفاده از روش های ایمونوهیستوشیمی و وسترن بلات در نمونه های بافت توموری بیماران مبتلا به سرطان پستان در مقایسه با بافت های نرمال حاشیه تومور انجام شد. آزمون های آماری t-test و Mann–Whitney برای مقایسه میانگین ها، آزمون χ 2 برای بررسی ارتباط سطح پروتئین با پارامترهای بالینی-پاتولوژیکی بیماران صورت گرفت. همچنین، P value کمتر از 05/0 معنی دار تلقی شد. یافته‌ها: بررسی میزان mRNA با روش Real-time PCR نشان داد که سطح mRNA ی Rab25، Rab31 و Snail در نمونه های بافت توموری بیماران مبتلا به سرطان پستان بیشتر از بافت های نرمال حاشیه تومور بود (01/0p<). نتایج وسترن بلات و ایمونوهیستوشیمی نیز نشان داد که سطح پروتئین Rab25 و Snail در نمونه های بافت توموری بطور قابل چشمگیری بیشتر از سطح آن در بافت های نرمال حاشیه تومور بود. علاوه بر این، همبستگی مثبتی بین سطوح پروتئینی Rab25 و Snail، هم در نمونه های بافتی سرطان پستان (517/0= r ، 001/0 = P) و هم در بافت های نرمال حاشیه تومور (226/0= r ، 064/0 = P) وجود داشت. با این وجود میزان بیان Rab31 و Snail هم در نمونه های بافتی سرطان پستان (170/0= r ، 165/0 = P) و هم در بافت های نرمال حاشیه تومور (088/0= r ، 475/0 = P) همبستگی مثبت ضعیف با یکدیگر دارند. همبستگی معنی داری بین سطوح Rab25 با Let-7d و miR-185 ( به ترتیب 717/0- = r ، 001/0 = P و 526/0- = r ، 015/0 = P)، همچنین Rab31 با miR-140 و miR-196a ( به ترتیب 530/0- = r ، 011/0 = P و 683/0 = r ، 005/0 = P ) وجود داشت. بر طبق نتایج، Let-7d، miR-185 و miR-140 بطور معنی‌داری در سرطان کاهش بیان داشتند درحالیکه miR-196a افزایش بیان را نشان داد (001/0p<) و این تغییرات رابطه مستقیمی با پیشرفت مراحل بالینی بیماری داشت. نتيجه‌گيري: مطالعه حاضر، تغییرات قابل توجهی را در بیان Rab25 و Rab31 و میکروRNAهای کنترل کننده آن ها در بیماران سرطان پستان در مقایسه با نمونه های کنترل گزارش کرد، که می تواند از نظر بالینی برای پی بردن به ویژگی های سرطان پستان مهم باشد.