بررسی آزمایشگاهی تاثیر فیبرین غنی از پلاکت پیشرفته + (+A-PRF) اصلاح شده با نانو ذرات طلا بر روی تمایز استئوبلاستی سلول های بنیادی مزانشیمی انسانی

Abstract

از میان انواع افشره های پلاکتی، فیبرین غنی از پلاکت (PRF) امروزه بیشترین مورد مصرف را دارد. علی رغم اثبات مفید بودن PRF در درمان های ترمیم بافت نرم، هنوز شواهد کافی بالینی در مورد اثر مثبت آن بر روی بازسازی استخوان وجود ندارد. نشان داده شده است که نانوذرات طلا قادر به تقویت تمایز استئوژنیک و معدنی شدن استخوان هستند. هدف از مطالعه حاضر بررسی تاثیر A-PRF+ اصلاح شده با نانوذرات طلا بر روی تمایز استئوبلاستی سلولهای بنیادی مزانشیمی انسانی خواهد.

مواد و روش‏ها: در این مطالعه از چهار فرد سالم 6 نمونه خونی به حجم 8 میلی لیتر گرفته شد و به نیمی از لوله ها یک دهم میلی لیتر سوسپانسیون نانوذره طلا با غلظت بهینه اضافه گردیده و به منظور یکنواخت سازی به آرامی تکان داده شد .لوله ها به منظور تهیه A-PRF+ به مدت 8 دقیقه با سرعت 1300دور در دقیقه سانتریفیوژ شدند. پس از تهیه A-PRF+ ساده و اصلاح شده با نانو ذره طلا، تاثیر آنها بر روی تکثیر و تمایز استئوبلاستی سلولهای بنیادی مزانشیمی انسانی با تستهای MTT، Alkaline Phosphatase و رنگ آمیزی Alizarine Red S اندازه گیری شده و نتایج به دست آمده با استفاده از نرم افزار GraphPad Prism 6 مورد آنالیز آماری قرار گرفت .

یافته‏ ها: میزان تکثیر سلول هایی که تحت تاثیر A-PRF+ ساده و اصلاح شده با نانو ذره طلا قرار گرفته بودند به شکل معنی داری بالاتر از گروه کنترل بود ( p<0.05). همچنین میزان فعالیت آلکالین فسفاتاز در گروه A-PRF+ اصلاح شده با نانو ذره طلا به شکل معنی داری بالاتر از گروه کنترل و A-PRF+ ساده بود. تحت رنگ آمیزی Alizarin redرسوب کریستال های کلسیم فقط در گروه A-PRF+ اصلاح شده با نانوذرات طلا مشاهده گردید. نتیجه گیری: افزودن نانوذره طلا به A-PRF+ موجب بهبود توانایی آن در تحریک تمایز استئوبلاستی سلولهای بنیادی مزانشیمی انسانی می شود