تولید باکتریوفاژهای متصل شونده به سلولهای بیان کننده EGFR با هدف دارورسانی هدفمند و تصویربرداری سلولی

Abstract

مقدمه: گیرنده فاکتور رشد اپی درمال (EGFR) یکی از گیرنده های خانواده تیروزین کینازی بوده که نقش آن در القای تومور اثبات شده است. برخی از سلول های سرطانی این گیرنده را به میزان زیاد بیان می کنند. بنا بر این گیرنده EGFR می تواندجهت هدف درمانی سلول های سرطانی مورد استفاده قرار گیرد. هدف: مطالعه حاضر بر آن است تا با تولید وکتورهای باکتریوفاژی که در سطح خود EGF متصل به GFP را دارا میباشد امکان تصویر برداری فلورسانس و شناسایی سلول های سرطانی را فراهم آورد. روش ها: در قسمت N-ترمينال ژن کد کننده پروتئین pIII در فاژمید pIT2 توالي کد کننده ژن EGF-sfGFP را كلون كرده و با استفاده از سيستم باکتريايي پروتئين های sfGFP و EGF به همراه پروتئين pIII در سطح فاژ توليد شد. اتصال فاژهاي نمایش دهنده EGF-sfGFP با گيرنده هاي EGFR در سطح سلول هاي سرطاني از طریق تصویر برداری فلووسانس، آنالیز فلوسیتومتری و ELISA بررسی شد. یافته ها: نتایج حاصل از فلوسیتومتری نشان داد که میانگین شدت فلورسانس سلول های A-431 انکوبه شده با باکتریوفاژهای حاوی EGF-sfGFP در مقایسه با نمونه های کنترل به طور معنی داری تغییر پیدا کرده است. در تصویربرداری سلولی با استفاده از میکروسکوپ فلورسانس و آزمایش ELISA، باکتریوفاژهای حاوی EGF-sfGFP توانستند گیرنده های EGFR را در سطح سول های A-431 شناسایی کنند. نتیجه گیری: در مطالعه حاضر باکتریوفاژهای حاوی EGF-sfGFP تولید شده و قابلیت شناسایی گیرنده های EGFR در سطح سلول های سرطانی A-431 با استفاده از آزمایش های فلوسیتومتری، عکس برداری سلولی و ELISA ثابت شد. بنابر این باکتریوفاژ نمایش دهنده EGF-sfGFP می تواند برای اهداف مختلفی شامل تصویر برداری فلورسانس و طراحی سیستم های ژن رسانی مورد استفاده قرار گیرد.