بررسی فیتو شیمیایی و بیو اكتیویته Astragalus maximus و Astragalus chrysostachys

Abstract

مقدمه گیاهان جنس Astragalus (خانواده نخود) از مهمترین گیاهان دارویی میباشند که به علت داشتن تنوع در فعالیت بیولوژیک و ترکیبات شیمیایی، از نظر بررسیهای فیتوشیمیایی بسیار مورد توجه واقع شده‌اند. از این جنس اثرات بیولوژیک متعددی چون، اثرات ضد‌ویروس، ضد‌باکتری، ضد‌تومور و آنتیاکسیدان گزارش شده است. مطالعات وسیع روی ترکیبات شیمیایی گونه‌های Astragalus نشان داده که این جنس غنی از ساپونین‌ها، فلاونویید‌ها و ساکاریدها میباشد.هدف با توجه به اینکه در گیاهان جنس Astragalus ترکیباتی وجود دارد که از دیدگاه فارماکولوژیکی و شیمیایی حائز اهمیت هستند، لذا در این تحقیق بررسی ترکیبات شیمیایی و بایو‌اکتیویته دو گونه بومی ایران مورد نظر قرار گرفت.روش کار به منظور بررسی ترکیبات شیمیایی دو گونه Astragalus maximus و Astragalus chrysostach، از ریشه دو گیاه به روش ماسراسیون توسط حلال متانول %70 عصاره‌گیری انجام شد. پس از تبخیر متانول موجود در عصاره هیدروالکلی، عصاره آبی باقیمانده به ترتیب توسط حلال‌های اتیل استات و n-بوتانول با روش حلال به حلال مورد استخراج قرار گرفت. در نهایت عصاره‌ها به روش‌های مختلف از جمله VLC, CC, Prep -HPLC, Prep -TLC, SPE و ژل فیلتراسیون توسط حلالهای مختلف مورد آنالیز قرار گرفتند. تعداد 11 ترکیب جداسازی و تعیین ساختمان شیمیایی ترکیبات با استفاده از طیف‌گیری 1HNMR،13CNMR ، DEPT135 ، HSQC، HMBCو COSY صورت پذیرفت. علاوه بر این، ترکیبات اسانسی هر دو گونه توسط دستگاه GC/MS مورد شناسایی قرار گرفت. همچنین فعالیت آنتیاکسیدانی عصاره‌ها در مدل‌های مختلف و خواص ضد میکروبی آنها ارزیابی شدند.نتایج شناسایی ساختار شیمیایی ترکیبات خالص سازی شده از عصاره‌های اتیل استاتی و n-بوتانولی، وجود فلاونوییدهای لیکوئی ریتیژنین، فورمونونتین، ایزوکوئرسیتروزید، آپی ژنین- 6و 8- دی- C- گلوکوزید و ترکیب ساپونینی آستراگالوزید I و همچنین ترکیبات اولیگوساکاریدی در این گونه‌ها را مشخص نمود. بررسی فعالیت آنتیاکسیدانی کلیه عصاره‌های حاصل از هر دو گونه در تمامی مدلهای آنتیاکسیدانی مورد مطالعه سطوح مختلفی از فعالیت آنتیاکسیدانی را از خود نشان دادند. علاوه بر این عصاره تام و سایر عصاره‌های هر دو گونه برروی دو سویه از باکتریهای گرم مثبت موثر بودند.نتیجه‌گیری مطالعه فیتوشیمیایی حاضر بر روی دو گونه Astragalus maximus و Astragalus chrysostachys حضور 4 ترکیب فلاونوییدی،1 ساپونین و2 ترکیب اولیگو ساکاریدی را مشخص نمود., Plants of genus Astragalus (family Fabaceae) are important medicinal plants which have drawn researchers’ attention due to their chemical and biological diversities. Iran is one of the largest centers of diversity for this genus. Anti-viral, anti-bacterial, anti-tumor and anti-oxidant effects have been reported from plants of this genus. Extensive studies of the chemical components of Astragalus have proven that this genus was rich in saponins, flavanoids and polysaccharides.Scope Due to the presence of the above-mentioned compounds which are so important from pharmacological and chemical point of view in Astragalus genus, we decided to study on the composition of A. maximus and A. chrysostachys from Iran.ExperimentalIn order to phytochemical analysis of A. maximus and A. chrysostachys roots, the extraction was performed by maceration using methanol 70%. The resultant hydroalcolic extract was evaporated to yield an aqueous extract. Afterwards, the aqueous extract was partionated through decantation with ethyl acetate and n-butanol, respectively. The extracts were further analyzed through various isolation methods including VLC, CC, Prep -HPLC, Prep -TLC, SPE and gel filtration with different solvents. Structure elucidation for the separated compounds (11 pure compounds) was accomplished by using various spectroscopic methods including 1D NMR and 2D NMR. Moreover, the essential oils were obtained by hydro-distillation and the compositions of the essential oils were determined by GC/MS. Additionally, evaluation of the antioxidant and antimicrobial activities of the extracts were performed.ResultsStructure elucidation and identification of the purified compounds from the ethyl acetate and n-butanol extracts, yielded in identification of Liquiritigenin, Formononetin, Isoquercitrin , Apigenin-6,8-di-C-glucoside, a saponin Astragaloside I together with some oligosaccharides.In regard to the antioxidant activity, all extracts showed different levels of the antioxidant effects. Moreover, A. maximus and A. chrysostachys extracts revealed antibacterial activities against two gram positive microorganisms.ConclusionPhytochemical study on A .maximus and A. chrysostachys revealed the presence of 4 flavonoids,1 saponin and 2 oligosaccharides.