پیش تغلیظ و تعیین مقدار کروماتوگرافیک وراپامیل در بازدم

Abstract

مقدمه وراپامیل متعلق به دسته بلوکه کننده کانال های کلسیم بوده و در درمان طیف وسیعی از بیماری های قلبی – عروقی مانند تاکی آریتمی های فوق بطنی،آنژین صدری، کاردیومیوپاتی هایپرتروفیک و فشارخون استفاده می شود. پایش سطح وراپامیل در مایعات بیولوژیک توصیه شده است بنابراین اندازه گیری سطح آن در مایعات بیولوژیک دارای اهمیت است. هدف بکارگیری یک روش سریع و قابل اعتماد برای پیش تغلیظ و تعیین مقدار وراپامیل در نمونه های بازدمی بود.روش کار برای پیش تغلیظ نمونه های بازدمی وراپامیل از روش میکرواستخراج مایع – مایع پخشی و برای شناسایی وراپامیل از دستگاه کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا همراه با دتکتور UV-vis در طول موج 200 نانومتر استفاده شد. متد براساس گایدلاین FDA معتبرسازی شد. یافته ها تحت شرایط بهینه، محدوده خطی بین / تا / میکروگرم بر میلی لیتر و ضریب همبستگی (r2) برابر / به دست آمد. مقادیر انحراف از معیار استاندارد درون روزی و بین روزی (%RSD) و خطای نسبی (RE%) روش کمتر از 15 درصد به دست آمد که نشان دهنده دقت و صحت خوب روش می باشد. روش پیشنهادی برای آنالیز وراپامیل در نمونه های حقیقی بیماران با موفقیت مورد استفاده قرار گرفت.نتیجه گیری روش مورد استفاده برای استخراج (DLLME) ، ساده ، سریع ، ارزان ، راحت و کارآمد بوده و از دقت ، صحت ، گزینش پذیری و پایداری خوبی برای اندازه گیری وراپامیل در بازدم برخوردار می باشد. برای اولین بار وراپامیل در یک نمونه بیولوژیکی جدید یعنی نمونه بازدمی بررسی شد و غلظت آن در نمونه های بازدمی بیماران با موفقیت اندازه گیری شد., Introduction Cardiovascular diseases (CVDs) are common causes of morbidity and mortality in all countries of the world. Quantification of CVD drugs such as calcium channel blockers in biological samples is essential in pharmacokinetic study and therapeutic drug monitoring. Verapamil hydrochloride as a calcium channel blocker is used to treat a number of cardiovascular diseases such as supraventricular tachyarrhythmias, angina pectoris, hypertrophic cardiomyopathy and hypertension. Exhaled breath condensate (EBC) could be used as a non-invasive sampling method. EBC sample collection presents some benefits over the invasively collected samples; i.e. ease of operation, no need for skilled operator, less staff time, painless, simple matrix and inexpensive set-up. Therefore, EBC sample is a promising biological matrix enabling more convenient drug monitoring.Methods In this work, dispersive liquid–liquid microextraction procedure (DLLME) was employed for pre-concentration of verapamil in EBC samples and followed by determination with high-performance liquid chromatography- ultraviolet detection (HPLC -UV) at 200 nm. The proposed method was validated according to FDA guidelines for biological samples.Results Under the optimum conditions, the method provided a linear range between 0.07 to 0.8 µg.mL-1 with a correlation coefficient (R2) of 0.998. The intra- and inter-days relative standard deviation (RSD%) and relative error (RE%) values of the method were below 15%, which indicate good precision and accuracy. The proposed method was successfully applied for analysis of verapamil in real samples.Conclusion A reverse-phase HPLC-UV method was developed and validated for analysis of verapamil in human EBC samples. The DLLME was used to extract verapamil from EBC samples that was rapid and simple method. The proposed method indicate good accuracy and precision, selectivity and stability.