بررسی ترکیبات فنولی و بایواکتیویته گیاه Marrubium propinquum

Abstract

جنس Marrubium با داشتن 40 گونه در سراسر جهان و 10 گونه در ایران به عنوان یکی از مهم ترین جنس های گیاهی کشورمان به شمار می رود. گیاهان جنسMarrubium مدت های مدیدی به عنوان داروی سنتی استفاده می شدند .با توجه به ارتباط بین ترکیبات شیمیایی موجود در گیاهان و اثرات مشاهده شده از آن ها ضرورت بررسی و شناسایی ترکیبات موثره گیاهان آشکار می شود.هدف به لحاظ اهمیت دارویی ترکیبات موجود در جنس ماروبیوم، M. propinquum، جهت بررسی ترکیبات شیمیایی و تعیین فعالیت آنتی اکسیدانی عصاره متانولی و فراکسیون های آن انتخاب شد. روش کار عصاره گیری از اندام هوایی گیاه با روش ماسراسیون توسط حلال های اترنفت، کلروفرم و متانول انجام گردید. سپس عصاره متانولی به روش SPE فراکسیونه شد. تعیین سیستم گرادیانت مناسب برای فراکسیون های متانولی با استفاده از HPLC آنالیتیکال صورت گرفت و پس از آن با HPLC پره پراتیو ترکیبات خالص جداسازی گردید. تعیین ساختمان شیمیایی ترکیبات خالص توسط طیف های NMR صورت پذیرفت. علاوه بر این، روغن فرار M. propinquum به روش GC-MS آنالیز شد. همچنین، فعالیت آنتی اکسیدانی عصاره متانولی و فراکسیون های آن ارزیابی شدند. نتایج از فراکسیون های 40% و 60% عصاره ی متانولی این گیاه، تعداد 3 ترکیب شناسایی گردید. این ترکیبات شامل کامفرول-7-O-گلوکوزید، Jionoside D ایزورامنتین-3-O-گلوکوزید-('"2- پارا کوماریک اسید) بودند. بررسی ترکیبات روغن فرار نشان داد ترکیبات غیر ترپنی و سزکویی ترپنی از جمله اجزای اصلی اسانس بودند. با توجه به نتایج حاصل از بررسی فعالیت آنتی اکسیدانی و محاسبه RC50، مشاهده شد که عصاره متانولی و فراکسیون های آن در مقایسه با استاندارد کرستین اثر آنتی اکسیدانی مطلوبی از خود نشان دادند.نتیجه گیری مطالعه ی فیتوشیمیایی گیاه M. propinquum حضور ترکیبات فنولیک با خواص آنتی اکسیدانی چشمگیری را مشخص نمود. , Introduction The genus Marrubium with about 40 species of flowering plants is considered to be one of the largest genera of lamiaceae. Since ancient times, this genus has been accepted for remedy of several disorders such as dyspeptic complaints, loss of appetite, cough, wound healing and as a choleretic in digestive and biliary complaints. Phytochemical analyses of Marrubium have been demonstrated that it is rich in polyphenols, flavonoids, phenylethanoids, sterols, saponins and tannins.Objectives According to the widespread usage of the species in traditional and folk medicine in Iran, M. propinquum was selected for phytochemical study along with an assessment on antioxidant activity which has not been studied so far. Experimental The air-dried and powdered aerial parts of M. propinquum was successively extracted at room temperature with solvents of increasing polarity, petroleum ether, chloroform and methanol using maceration method. The methanolic extract (2g) was subjected to Sep-Pak fractionation using a step gradiant of MeOH-H2O mixture (1090, 2080, 4060, 6040, 8020, 1000). Furthermore, purification of the fractions by preparative reversed-phase HPLC yielded 24 compounds. The structure of three compounds have been elucidated by 1D NMR and 2D NMR. The essential oil was obtained by hydro-distillation with a Clevenger-type apparatus. The composition of the essential oil was determined by GC-MS. Additionally, free radical scavenging activity of the methanolic extract and its fractions were evaluated using DPPH and nitric oxide assays.Results Preparative reversed-phase HPLC analysis of 40% and 60% Sep-Pak fractions yielded a flavonoid, an acylated flavonoid and one phenylethanoid glycosides. Essential oil was typically a complex mixture of mainly non-terpenoids, sesquiterpene hydrocarbons, oxygenated sesquiterpene and some monotrpenes.The methanol extract and its fractions showed significant antioxidant activity. Conclusion Phytochemical analysis on the aerial parts of M. propinquum showed the presense of phenolic compounds (flavonoid, acylated flavonoid and phenylethanoid glycosides) with significant antioxidant activity. Key words Marrubium propinquum, acylated flavonoid, phenylethanoid, nitric oxide